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一種高活性負載抗原的樹突狀細胞的制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-03
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310007145.X 
  • 技術(專利)名稱 一種高活性負載抗原的樹突狀細胞的制備方法 
  • 項目單位 高岱清
  • 發明人 高岱清,于華,馬偉,趙鵬,解西河,魏曉芳,李長優,孫偉紅 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 馮園源
  • 發布時間 2022-02-03  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種制備高活性負載抗原的樹突狀細胞的制備方法,包括以下步驟:a、從外周血中采集和分離單個核細胞;b、將步驟a得到的單個核細胞加入DC無血清培養液中,再向培養液中加入細胞因子IL-4和GM-CSF,然后置于37℃、5%CO2培養箱中培養,6天后收集樹突狀細胞;c、在含有步驟b收集樹突狀細胞的培養液里,加入相應的抗原和結核分枝桿菌純蛋白衍生物(PPD),繼續培養,即可獲得高活性的負載抗原的樹突狀細胞。該制備方法在負載腫瘤抗原時加入PPD,類似于免疫佐劑的作用,增加了DC處理腫瘤抗原的能力,從而間接的提高了由這些細胞刺激產生的CTL對腫瘤細胞的殺傷活性。
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  • 02

    說明書

    1.一種高活性負載以惡性黑色素瘤細胞株裂解物為抗原的樹突狀細胞的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:a、從外周血中采集和分離單個核細胞;b、將步驟a得到的單個核細胞加入DC無血清培養液中,再向培養液中加入細胞因子IL-4和GM-CSF,然后置于培養箱中培養后收集樹突狀細胞;c、在含有步驟b收集樹突狀細胞的培養液里,加入相應的抗原和結核分枝桿菌純蛋白衍生物,繼續培養,即可獲得高活性的負載抗原的樹突狀細胞。2.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,所述步驟c培養液中結核分枝桿菌純蛋白衍生物的濃度為0.1u/ml-2u/ml。3.根據權利要求2所述的制備方法,其特征在于,所述步驟c培養液中結核分枝桿菌純蛋白衍生物的濃度為0.5u/ml,繼續培養的時間為2天。4.根據權利要求3所述的制備方法,其特征在于,所述步驟b中將培養液置于?37℃、5%CO2培養箱中培養6天收集樹突狀細胞。5.根據權利要求1或2或3或4所述的制備方法,其特征在于,所述步驟a中所述分離單個核細胞是將獲得的血細胞樣本,用淋巴細胞分層液除去混雜的紅細胞和粒細胞,用生理鹽水低速離心洗滌3次,除去血小板獲得。6.根據權利要求5所述的制備方法,其特征在于,所述步驟b中IL-4濃度為5ng/ml-100ng/ml,GM-CSF濃度為10ng/ml-500ng/ml,培養3-4天補液至原體積。7.根據權利要求6所述的制備方法,其特征在于,所述步驟b中IL-4濃度為50ng/ml,GM-CSF濃度為250ng/ml。8.根據權利要求1所述的制備方法,其特征在于,在所述步驟b的所述培養液中加入抗生素。
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專利技術附圖

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