本發(fā)明提供螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，主要采用反復(fù)凍融與超聲破碎相結(jié)合的方法提取螺旋藻蛋白，胰蛋白酶水解螺旋藻蛋白,葡聚糖凝膠柱分離純化,超濾離心管過(guò)濾,再采用三聚磷酸鈉離子交聯(lián)法等步驟制備螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒子。本發(fā)明得到的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒Y2-CS具有下述抗腫瘤活性：對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7體外生長(zhǎng)具有一定的抑制作用，并呈現(xiàn)一定的劑量關(guān)系，當(dāng)濃度為250μg/mL時(shí)，最高抑制率可達(dá)26.05%.因而本發(fā)明得到的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒有利于抗腫瘤保健食品和醫(yī)藥產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用。

1.螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于具體包括如下步驟：?（1）取螺旋藻粉溶于Milli-Q水中，常溫下磁力攪拌，待其全部溶解后置于冰箱中冷凍中，再置于冰箱中解凍，如此反復(fù)凍融三次，然后，采用超聲破碎方法，將螺旋藻壁破碎，使得蛋白質(zhì)游離出來(lái)，將蛋白質(zhì)置于冰浴中，最后，將獲得的溶液離心，去除沉淀獲得蛋白上清液,?再真空冷凍干燥，獲得螺旋藻蛋白質(zhì)粉；（2）以步驟（1）得到的螺旋藻蛋白質(zhì)粉為基礎(chǔ),?配制質(zhì)量濃度為1~5%的螺旋藻蛋白水溶液，加入水解酶進(jìn)行水解，水解后，滅酶，冷卻至室溫后將水解液離心，取上清液，然后,經(jīng)截留分子量為10?KD的超濾離心管過(guò)濾，濾液再經(jīng)過(guò)5?KD、10?KD的超濾離心管過(guò)濾，即可獲得分子量大小范圍為<5?KD、5-10?KD、>10?KD的螺旋藻多肽水解液；所述水解酶為胰蛋白酶；所述水解為在溫度30~50?℃，pH=?5~10，酶與螺旋藻蛋白質(zhì)水溶液的比1%~5%（w/v）下水解,?水解時(shí)間5~15h；(3)?以步驟（2）得到的5-10?KD的螺旋藻多肽水解液為基礎(chǔ),?使用葡聚糖凝膠Sephadex?G-50分離純化，并且按照出峰順序共收集到三個(gè)峰，分別為第一個(gè)峰Y1，第二個(gè)峰Y2，第三個(gè)峰Y3；所述葡聚糖凝膠Sephadex?G-50分離純化為在洗脫速度為0.2~2?mL/min，上樣體積為1~4?mL，洗脫液為超純水，檢測(cè)波長(zhǎng)為215?nm下分離純化；(4)?以步驟（3）得到的純化的螺旋藻多肽水解液Y2為基礎(chǔ),再采用三聚磷酸鈉（TPP）離子交聯(lián)法即可得到螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒Y2-CS。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（1）所述螺旋藻粉為5~50?g；所述Milli-Q水為100~1000?mL；所述磁力攪拌的時(shí)間為10~60?min。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（1）所述冷凍為在-20?℃冰箱中冷凍80?min；所述解凍為在4?℃冰箱中解凍。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（1）所述超聲破碎方法為在10~300?W的超聲功率下超聲，每超聲5~20?s間隔3~10?s,共超聲10~300次。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（1）所述離心為在溫度4?℃,轉(zhuǎn)速為5000~10000?r/min下離心10~60?min。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（2）所述滅酶為在100?℃水中滅酶10?min；所述離心為在5000?r/min?下離心?25?min。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（2）所述過(guò)濾為在6000?g、4?℃條件下經(jīng)超濾離心管過(guò)濾。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的螺旋藻多肽-殼聚糖納米粒的制備方法，其特征在于步驟（4）所述三聚磷酸鈉（TPP）離子交聯(lián)法為把1~5mL濃度為0.3~2?mg/mL的螺旋藻多肽水解液Y2與3~10?mL濃度為1~4?mg/mL的殼聚糖醋酸溶液混合均勻，再將濃度為0.1~2?mg/mL的TPP水溶液逐漸滴加到Y(jié)2和殼聚糖醋酸溶液體系中，磁力攪拌反應(yīng)1個(gè)小時(shí)。