本發明公開了一種1,2,4-丁三醇的生物合成方法。該方法包括用重組生物細胞將蘋果酸或其鹽轉化為1,2,4-丁三醇的步驟；所述重組生物細胞表達具有將蘋果酸或其鹽轉化為1,2,4-丁三醇功能的酶系統。所述酶系統包括如下：(a1)具有將蘋果酸或其鹽轉化為蘋果酰輔酶A功能的酶；(a2)具有將所述蘋果酰輔酶A轉化為蘋果酸半醛功能的酶；(a3)具有將所述蘋果酸半醛轉化為2,4-二羥基丁酸功能的酶；(a4)具有將所述2,4-二羥基丁酸轉化為2,4-二羥基丁酰輔酶A功能的酶；(a5)具有將所述2,4-二羥基丁酰輔酶A轉化為1,2,4-丁三醇功能的酶。本發明對建立擁有自主產權的、原料價格低廉的、合成途徑全新的、轉化效率較高的1,2,4-丁三醇的生物合成方法具有重要意義。