該成果涉及基因工程和酶工程技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種制備異源四聚體α2β2型藍(lán)藻PDHc E1的方法，包括：先分別制備藍(lán)藻丙酮酸脫氫酶PDHc E1的α亞基和β亞基所對應(yīng)的DNA片段，然后將α亞基對應(yīng)的DNA片段和β亞基對應(yīng)的DNA片段分別克隆到pETDuet?1載體的多克隆位點1區(qū)域和多克隆位點2區(qū)域，獲得重組質(zhì)粒pETDuet?1?α?β；再將重組質(zhì)粒pETDuet?1?α?β和伴侶蛋白表達(dá)質(zhì)粒pGro7共轉(zhuǎn)化到同一宿主細(xì)胞中，得到pETDuet?1?α?β?pGro7重組宿主細(xì)胞；最后進(jìn)行通過宿主細(xì)胞的培養(yǎng)，蛋白誘導(dǎo)表達(dá)，菌體收集，超聲波破碎等蛋白表達(dá)分離純化流程，即可獲得異源四聚體α2β2型藍(lán)藻PDHc E1。該成果提供的制備方法不受生物組織的限制，操作簡單、高效、制備成本低，獲得的藍(lán)藻PDHc E1產(chǎn)量高、純度高、活性高。

該成果涉及基因工程和酶工程技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種制備異源四聚體α2β2型藍(lán)藻PDHc E1的方法，包括：先分別制備藍(lán)藻丙酮酸脫氫酶PDHc E1的α亞基和β亞基所對應(yīng)的DNA片段，然后將α亞基對應(yīng)的DNA片段和β亞基對應(yīng)的DNA片段分別克隆到pETDuet?1載體的多克隆位點1區(qū)域和多克隆位點2區(qū)域，獲得重組質(zhì)粒pETDuet?1?α?β；再將重組質(zhì)粒pETDuet?1?α?β和伴侶蛋白表達(dá)質(zhì)粒pGro7共轉(zhuǎn)化到同一宿主細(xì)胞中，得到pETDuet?1?α?β?pGro7重組宿主細(xì)胞；最后進(jìn)行通過宿主細(xì)胞的培養(yǎng)，蛋白誘導(dǎo)表達(dá)，菌體收集，超聲波破碎等蛋白表達(dá)分離純化流程，即可獲得異源四聚體α2β2型藍(lán)藻PDHc E1。該成果提供的制備方法不受生物組織的限制，操作簡單、高效、制備成本低，獲得的藍(lán)藻PDHc E1產(chǎn)量高、純度高、活性高。