本發(fā)明涉及原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基及其使用方法，原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基包括以下組分：α?MEM培養(yǎng)液、AMD3100、BMP?4、胰島素、FGF?2、IL?6和LIF。培養(yǎng)基中不加胎牛血清，從而避免了臨床應(yīng)用中可能產(chǎn)生的免疫排斥反應(yīng)，減少了病原微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)；通過(guò)添加IL?3、IL?6、G?CSF和SCF等細(xì)胞因子可協(xié)同F(xiàn)L產(chǎn)生強(qiáng)烈的增殖效應(yīng)同時(shí)抑制臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分化；通過(guò)添加EGF可協(xié)同F(xiàn)GF?2促進(jìn)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖分化；通過(guò)加入BMP?4作為干細(xì)胞增殖分化的營(yíng)養(yǎng)因子，能夠維持并調(diào)節(jié)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞正常的增殖狀態(tài)。

1.一種原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，包括以下組分：α-MEM培養(yǎng)液、AMD3100、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷和細(xì)胞因子組合，所述AMD3100的濃度為0.5-5μg/ml，所述BMP-4的濃度為0.01-0.1ng/ml；所述胰島素的濃度為10-20μg/ml；所述FGF-2的濃度為1-12ng/ml，所述IL-6的濃度為0.05-0.15μg/ml；所述LIF的濃度為0.01-0.1μg/ml，所述三七總皂苷濃度為5-15μg/ml，所述細(xì)胞因子組合包括IL-3、SCF、G-CSF、FL和EGF；所述IL-3、SCF、G-CSF、FL和EGF的濃度分別為：IL-3 10-20ng/ml；SCF 50-150ng/ml；G-CSF 1-100ng/ml；FL 1-50ng/ml；EGF 5-15ng/ml。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基還包括地塞米松、轉(zhuǎn)鐵蛋白中的一種或幾種。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述地塞米松的濃度為0.1-0.5μg/ml；所述轉(zhuǎn)鐵蛋白的濃度為0.01-0.1μg/ml。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述α-MEM培養(yǎng)液為一種無(wú)血清培養(yǎng)液。5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結(jié)束。6.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結(jié)束。7.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到15天結(jié)束。8.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM 培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF、FL直到10天后停用。9.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、SCF、EGF、G-CSF直到10天后停用，培養(yǎng)第5天加入FL直到15天后停用。10.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于，所述原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基用于培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，所述使用方法包括以下步驟：a、在α-MEM培養(yǎng)液中按濃度加入AMD3100、地塞米松、轉(zhuǎn)鐵蛋白、BMP-4、胰島素、FGF-2、IL-6、LIF、三七總皂苷制作成培養(yǎng)液；b、在T75培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，每瓶8ml培養(yǎng)液，接種2ml華通氏膠的α-MEM培養(yǎng)液的懸液，密度為0.25g/ml，于37℃、5％CO₂的全飽和濕度下培養(yǎng)；c、培養(yǎng)前加入IL-3、EGF、G-CSF直到10天后停用，培養(yǎng)第5天加入SCF、FL直到15天后停用。