1.含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方法,其包括下述(A)~
(E)的步驟:
(A)使環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶作用于作為原料的含液化淀粉或糊精的任何一個
和L-抗壞血酸的溶液,接下來
使葡萄糖淀粉酶與之作用
而得到2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的生成率是27質量%以上且不滿35質量%的含
有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的溶液的步驟;
(B)將得到的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的溶液純化,使2-O-α-D-葡萄糖基-
L-抗壞血酸含量以無水物換算超86質量%的步驟;
(C)從含有以無水物換算超86質量%的2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的溶液通過控
制冷卻法或擬似控制冷卻法將2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的無水結晶析出的步驟;
(D)采集析出的2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的無水結晶的步驟;
(E)通過對采集的2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸的無水結晶不進行溶解、再結晶化而
進行成熟、干燥,根據需要粉碎而得到含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末
的步驟,所述含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末
含有以無水物換算超98.0質量%但不足99.9質量%的2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血
酸,
基于粉末X射線衍射特征算出的對于2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的結晶
化度是90%以上,
其中,
上述步驟(C)中的控制冷卻法是指當作為晶析步驟設定的作業時間設為τ、晶析開始時
的液溫設為T0、晶析結束時的目標液溫設為Tf時、時間t中的液溫T由下述式表示的冷卻方
法:
T=T0-(T0-Tf)(t/τ)3,且
上述步驟(C)中的擬似控制冷卻法是指與上述的控制冷卻法擬似的冷卻法,是指相對
于時間t連續或階段性地降低液溫T至在t=τ/2的時間點的液溫T的變化量(T0-Tm)維持在總
溫度變化量(T0-Tf)的5%以上但不足50%的范圍的冷卻法。
2.權利要求1所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方法,
其特征在于,在上述(A)的步驟中,使淀粉脫支酶與環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶一同作
用。
3.權利要求1或2所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方
法,其中上述(B)的步驟包括進行將陰離子交換樹脂作為填充劑使用的柱層析和將強酸性
陽離子交換樹脂作為填充劑使用的擬似移動床式的柱層析的步驟。
4.權利要求1或2所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方
法,其中上述環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶是有下述(a)~(d)所示的全部氨基酸序列的環
麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶:
(a)Asn-Glu-Val-Asp-X1-Asn-Asn;
(b)Met-Ile-Gln-X2-Thr-Ala;
(c)Pro-Gly-Lys-Tyr-Asn-Ile;
(d)Val-X3-Ser-Asn-Gly-Ser-Val,
但是,X1表示Pro或Ala,X2表示Ser或Asp,X3表示Ser或Gly。
5.權利要求1或2所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方
法,其中上述環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶是嗜熱脂肪土芽孢桿菌(Geobacillus
stearothermophilus)或嗜熱產硫嗜熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacter
thermosulfurigenes)來源的天然型或重組型酶。
6.權利要求1或2所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方
法,其中上述環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶是有序列表中的SEQ ID NO:1、3、4或5的任何一
個所示的氨基酸序列的環麥芽糖糊精-葡聚糖轉移酶。
7.權利要求1或2所述的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末的制造方
法,其特征在于,
得到的含有2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸無水結晶的粉末含有原料來源的L-抗壞血
酸及/或D-葡萄糖,
L-抗壞血酸量是以無水物換算0.1質量%以下,
粉末全體的還原力是不足1質量%。
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