本發明提供一種利用發酵法從牛膽汁中提取膽紅素的方法，主要包括牛膽汁的發酵、牛膽汁發酵液的滅菌、膽紅素的形成、膽紅素的提取與精制等四個步驟。本發明主要將高產β?葡萄糖醛酸苷酶且耐膽汁的產氣莢膜梭狀芽胞桿菌加入到動物膽汁中并進行發酵，通過加入巰醇類還原劑起到提高β?葡萄糖醛酸苷酶的活性和抗氧化劑的作用，在特殊條件的控制下使得整個工藝得到極大的優化，提高生產效率，降低成本，最終得到膽紅素產品的收率在0.010?0.014%之間，其純度達到92%以上。

1.一種利用發酵法從牛膽汁中提取膽紅素的方法，其特征在于：步驟如下：
(1)將產氣莢膜梭狀芽胞桿菌的菌株在液體培養基中進行擴大培養22-24h,得到擴增
菌液；
向過濾后的新鮮牛膽汁中加入擴增菌液在溫度為28-32℃條件下進行發酵45-48h，得
到發酵液，發酵過程中維持發酵液的pH為5-6；所述擴增菌液的體積為新鮮牛膽汁體積的9-
11％；
(2)向上步所得的發酵液中加入溶菌酶，在溫度為37-38度條件下進行酶解30-50min
后，調節其pH值為6.8-7.5，得到裂解液；
所述溶菌酶在發酵液中的質量體積濃度為0.2-0.25g/L；
所述發酵液裂解的同時加入質量濃度為1-2％的巰醇類還原劑溶液；
所述的巰醇類還原劑溶液與裂解液的體積比為1:50-60；
(3)向上步所得裂解液中加入濃度為10％的NaOH溶液，調節其pH為11-12，得到皂化液；
(4)將上步所得皂化液加熱煮沸1-3min，過濾，收集濾液，冷卻至室溫后向濾液中依次
加入抗氧化劑溶液、乙酸乙酯，然后加入混合酸調節其pH為5-5.5，充分攪拌后靜置分層，首
次取乙酸乙酯層；用飽和NaCl的HCl溶液對前述乙酸乙酯層進行二次酸化萃取，靜置分層后
再次取乙酸乙酯層進行蒸餾回收，得到的粗品膽紅素；
所述抗氧化劑為抗壞血酸或亞硫酸氫鈉，抗氧化劑溶液的質量濃度為1％，抗氧化劑溶
液與濾液的體積比為1:100；
所述乙酸乙酯的體積為濾液體積的50-60％，所述混合酸為HCl和HAc，其中HCl和HAc的
體積比為1:4-5；再次酸化萃取時飽和NaCl的稀HCl溶液的體積為首次取得的乙酸乙酯層體
積的30％；
(5)將上步所得粗品膽紅素用溫度為60-70℃的無水乙醇進行2次以上溶解洗滌，降溫
冷卻結晶得膽紅素精制品；
所述步驟1中，在向過濾后的新鮮牛膽汁中加入擴增菌液前，向已經過濾的新鮮牛膽汁
中依次加入質量濃度為0.5％的乙二胺四乙酸鈉溶液和質量濃度為1％的抗氧化劑；
所述抗氧化劑為抗壞血酸或亞硫酸氫鈉，所述乙二胺四乙酸鈉溶液和抗氧化劑的體積
與新鮮牛膽汁的體積比均為1:100；
所述巰醇類還原劑為β-巰基乙醇或二硫蘇糖醇。
2.如權利要求1所述的利用發酵法從牛膽汁中提取膽紅素的方法，其特征在于：所述步
驟2中酶解的同時利用超聲波對發酵液進行處理。