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葉下珠多糖組份在制備抗乙肝病毒的藥物中的應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-03
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310006353.8 
  • 技術(專利)名稱 葉下珠多糖組份在制備抗乙肝病毒的藥物中的應用 
  • 項目單位 福建農林大學
  • 發明人 李清祿,李凌峰,李宇翔,張麗麗,謝勇平,蔡向陽,黃志堅 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 王項北
  • 發布時間 2021-12-03  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種葉下珠多糖組份在制備抗乙肝病毒的藥物中的應用,屬于醫藥領域。所述葉下珠多糖組份為葉下珠多糖組份PUIPⅡ,由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖4個單糖組成,且鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖的摩爾比為0.11:0.36:0.08:0.45。由藥用植物葉下珠經人工提取、分離純化而成。體外生物活性實驗表明,所述葉下珠多糖組份PUIPⅡ具有抑制HepG2.2.2.15細胞培養中HBsAg、HBeAg的分泌和HBV-DNA的復制,具有一定的體外抗HBV活性作用;體內活性實驗表明,PUIPⅡ在鴨體內對DHBVDNA有明顯抑制作用,且反彈較小,可用于制備抗乙肝病毒的藥物和保肝護肝保健品。
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  • 02

    說明書

    1. 一種葉下珠多糖作為唯一活性成分在制備抗乙肝病毒的藥物中的應用,其特征在于:所述葉下珠多糖為葉下珠多糖組份PUIPⅡ;所述葉下珠多糖組份PUIPⅡ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖4個單糖組成,且鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖和葡萄糖的摩爾比為0.11:0.36:0.08:0.45;所述的葉下珠多糖組份PUIPⅡ的提取分離方法,包括如下步驟:1)葉下珠全草用蒸餾水洗凈,干燥后粉碎,粉碎的葉下珠全草粉末,用石油醚在70~90℃下回流提取2~4次,每次1~3小時,棄去回流液,藥渣繼續用50~100%乙醇在80~95℃下回流提取2~4次,每次1~3小時,棄去回流液,得到的藥渣再用60~95 ℃水浸提3次,每次1~3小時,合并3次浸提液進行離心分離,離心速度2000~6000r/min,取清液濃縮至原體積1/4,加入4倍體積的90~100%乙醇,靜置24h,離心,取醇沉物即為粗多糖;2)除蛋白,采用Sevag法脫蛋白:將步驟1)得到的醇沉物用蒸餾水復溶得粗多糖溶液,在粗多糖溶液中加入氯仿和正丁醇混合液,粗多糖溶液:氯仿和正丁醇混合液體積為1~6:1~3,所述氯仿和正丁醇混合液中氯仿:正丁醇體積比=1~4:1~4,攪拌,充分靜置分層,棄去沉淀,重復1~10次后直至界面無白色沉淀;3)醇沉、洗滌:在除蛋白后的多糖溶液中加入3~6倍體積的75~100%乙醇,靜置12~36h,離心,沉淀依次用無水乙醇、丙酮、乙醚清洗,重復2~5次;4)透析、干燥:取醇沉、洗滌后的多糖加入蒸餾水,充分復溶后用蒸餾水透析,透析在磁力攪拌下進行,樣品液與蒸餾水體積比為1:10~30,4~8h換一次水,透析12~120h,透析完畢后將糖溶液放入冷凍干燥機中干燥得葉下珠精總多糖,多糖含量在95%以上;5)多糖各組分分離純化:葉下珠精總多糖過DEAE-52陰離子交換樹脂柱,用NaCl溶液梯度洗脫,NaCl溶液的濃度梯度分別為0、0.1、0.25、0.5、0.75mol/L;每種濃度NaCl溶液洗脫8小時,流速4mL/min,用管收集洗脫液,每10min收集一管,繪制洗脫曲線;所述洗脫曲線以收集的管序為橫坐標,溶液的光吸收度為縱坐標繪制而成;苯酚-硫酸法跟蹤檢測,得到的洗脫曲線上依次出現四個洗脫峰,分別代表四個多糖組分,按照出峰的順序分別記為PUIPⅠ、PUIPⅡ、PUIPⅢ和PUIPⅣ,收集第2主峰組分,濃縮,重蒸水透析,冷凍干燥得葉下珠多糖PUIPⅡ純組分。
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專利技術附圖

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