一種利用酒糟原料發酵生產丁二酸的方法，屬生物工程技術領域。本發明方法為新鮮酒糟經脫水、粉碎預處理后，配制成發酵培養基，再經酶預水解，及酶與琥珀酸放線桿菌的邊糖化邊發酵，產丁二酸濃度達25-40g/L，丁二酸對酒糟產率可達到0.033-0.050g/g干酒糟。本發明突出的優點是利用工業廢棄物酒糟為原料發酵生產丁二酸，用酒糟替代葡萄糖作為碳源，并且發酵培養基中不需外加氮源，既緩解了化學合成丁二酸的石化資源緊張問題，又防止酒糟污染環境，提升了酒糟的使用價值。

1.一種以酒糟為原料發酵生產丁二酸的方法，其特征是新鮮酒糟經脫水、粉碎預處理，配制成酒糟發酵培養基，再經α-淀粉酶預水解、及糖化酶和復合纖維素酶兩級預水解，然后與琥珀酸放線桿菌邊糖化邊發酵生產丁二酸，并從發酵液中提取丁二酸，步驟為：（1）新鮮酒糟預處理：將新鮮的酒糟放入105℃烘箱內，烘6~12?h，使其水份含量20%以下，酒精含量在0.005?g酒精/g酒糟以下；并粉碎，得到40~80目的干酒糟顆粒；（2）配制酒糟發酵培養基：發酵培養基組成質量濃度為：干酒糟400~1000?g/L，K₂HPO₄·3H₂O?2~3?g/L，NaH₂PO₄·2H₂O?2~3?g/L，MgCl₂·6H₂O?與CaCl₂?1~3?g/L，NaAc?1~3?g/L，pH為6.0~7.0，120℃滅菌20分鐘；（3）水解酶兩級預水解：在滅菌后的發酵培養基中，加入α-淀粉酶，其添加量為20~50?U/g干酒糟，酶解溫度80~100℃，作用時間0.5~1.0?h；待培養基溫度降為50~60℃后，再調pH為4.0~5.0，并同時加入糖化酶和復合纖維素酶，復合纖維素酶由市售的纖維素酶、纖維二糖酶和木聚糖酶組成，其添加量之比為每克干酒糟加入10~40?U糖化酶，1~20?FPU纖維素酶，1~10?U纖維二糖酶，10~50?U木聚糖酶，在溫度50~60℃繼續水解0.5~5?h；（4）同步糖化發酵：經兩級預水解后的發酵培養基，冷卻到35~40℃，接入琥珀酸放線桿菌CGMCC?No.1593，于30~45℃在充滿CO₂的環境中，靜止或震蕩培養20~72?h；并用碳酸鹽或堿溶液調節維持發酵液pH?6.0~7.5；（5）從發酵液中提取丁二酸：酒糟發酵結束后的發酵液，通過離心或板框壓濾得到發酵清液，調節pH為1~3，加入w/v發酵清液計0.5%~3.0%活性炭進行脫色，用732陽離子交換樹脂脫鹽，再通過萃取劑萃取，提取其中的丁二酸。2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于酒糟原料為釀造廢棄的黃酒酒糟或白酒酒糟。3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于從發酵液中提取丁二酸的萃取方法為：發酵液:萃取劑的體積比為1:0.8-1:1.5，萃取劑為三辛胺和正辛醇的混合溶劑，三辛胺:正辛醇的體積比為2:1~5:1，萃取溫度為25~40℃，萃取時間30~60?min，分液后取萃取相；然后在25~40℃下，按照萃取相:?碳酸鈉溶液體積比4:1~2:1的比例加入1~2mol/L的碳酸鈉溶液，反萃取45~60?min，反萃取后分液；最后將得到的反萃取溶液調pH至1~2.5，濃縮結晶，得到丁二酸晶體。