1.一種用于從單個宿主細胞產生至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子的方法，其中所述
兩種免疫球蛋白樣分子各自包含能夠形成界面的兩個CH3結構域，所述方法包括在所述細
胞中提供：
a.編碼第一含CH3結構域之多肽鏈的第一核酸分子，
b.編碼第二含CH3結構域之多肽鏈的第二核酸分子，
c.編碼第三含CH3結構域之多肽鏈的第三核酸分子，和
d.編碼第四含CH3結構域之多肽鏈的第四核酸分子，
其中，所述第一含CH3結構域之多肽鏈在366位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在351
位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基；并且其中所述第二含CH3結構域之多肽鏈在351位氨基酸
處包含天冬氨酸(D)殘基并且在368位氨基酸處包含谷氨酸(E)殘基；并且其中所述第三含
CH3結構域之多肽鏈在356位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在399位氨基酸處包含賴氨
酸(K)殘基；并且其中所述第四含CH3結構域之多肽鏈在392位氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘
基并且在409位氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘基，所述方法還包括培養所述宿主細胞并且使
所述至少四種核酸分子能夠表達以及從培養物中收獲所述至少兩種不同的免疫球蛋白樣
分子的步驟。
2.權利要求1所述的方法，其還包括為所述宿主細胞提供編碼共同輕鏈的核酸分子。
3.權利要求1所述的方法，其中所述含CH3結構域之多肽鏈各自還包含識別靶表位的可
變區。
4.權利要求3所述的方法，其中4個所述含CH3結構域之多肽鏈的4個可變區各自識別不
同的靶表位。
5.權利要求3所述的方法，其中所述第一含CH3結構域之多肽鏈的可變區和所述第二含
CH3結構域之多肽鏈的可變區識別不同的靶表位，而所述第三含CH3結構域之多肽鏈的可變
區和所述第四含CH3結構域之多肽鏈的可變區識別相同的靶表位。
6.權利要求5所述的方法，其中所述第三含CH3結構域之多肽鏈的可變區和所述第四含
CH3結構域之多肽鏈的可變區識別的靶表位與所述第一含CH3結構域之多肽鏈的可變區或
所述第二含CH3結構域之多肽鏈的可變區識別的靶表位相同。
7.權利要求5所述的方法，其中所述第三含CH3結構域之多肽鏈的可變區和所述第四含
CH3結構域之多肽鏈的可變區識別的靶表位與所述第一含CH3結構域之多肽鏈的可變區或
所述第二含CH3結構域之多肽鏈的可變區識別的靶表位不同。
8.權利要求3所述的方法，其中所述第一含CH3結構域之多肽鏈的可變區和所述第二含
CH3結構域之多肽鏈的可變區識別相同的靶表位，而所述第三含CH3結構域之多肽鏈的可變
區和所述第四含CH3結構域之多肽鏈的可變區識別不同于所述第一可變區和所述第二可變
區識別之靶表位的第二靶表位。
9.權利要求3所述的方法，其中所述靶表位位于相同的靶分子上。
10.權利要求9所述的方法，其中所述靶分子是可溶性分子。
11.權利要求9所述的方法，其中所述靶分子是膜結合分子。
12.權利要求3所述的方法，其中所述靶表位位于不同的靶分子上。
13.權利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子在相同細胞上表達。
14.權利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子在不同細胞上表達。
15.權利要求12所述的方法，其中所述不同的靶分子是可溶性分子。
16.權利要求12所述的方法，其中一種靶分子是可溶性分子，而第二種靶分子是膜結合
分子。
17.根據權利要求1所述的方法，其中所述至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子是抗體。
18.權利要求3至8、12至14或16中任一項所述的方法，其中至少一種所述靶表位位于腫
瘤細胞上。
19.權利要求3至8、12至14或16中任一項所述的方法，其中至少一種所述靶表位位于效
應細胞上。
20.權利要求19所述的方法，其中所述效應細胞是NK細胞、T細胞、B細胞、單核細胞、巨
噬細胞、樹突狀細胞或嗜中性粒細胞。
21.權利要求19所述的方法，其中所述靶表位位于CD3、CD16、CD25、CD28、CD64、CD89、
NKG2D或NKp46分子上。
22.可由根據權利要求1至21中任一項所述的方法獲得的至少兩種不同免疫球蛋白樣
分子的混合物。
23.根據權利要求22的混合物，其中所述至少兩種免疫球蛋白樣分子與相同抗原上的
不同表位和/或不同抗原上的不同表位結合。
24.根據權利要求22的混合物，其中所述至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子包括至少
一種異二聚體免疫球蛋白樣分子。
25.根據權利要求22的混合物，其中所述至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子中的兩種
是異二聚體免疫球蛋白樣分子。
26.一種重組宿主細胞，其包含編碼至少第一含CH3結構域之多肽鏈、第二含CH3結構域
之多肽鏈、第三含CH3結構域之多肽鏈和第四含CH3結構域之多肽鏈的核酸序列，其中所述
第一含CH3結構域之多肽鏈在366位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在351位氨基酸處包
含賴氨酸(K)殘基；并且其中所述第二含CH3結構域之多肽鏈在351位氨基酸處包含天冬氨
酸(D)殘基并且在368位氨基酸處包含谷氨酸(E)殘基；并且其中所述第三含CH3結構域之多
肽鏈在356位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在399位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基；并且
其中所述第四含CH3結構域之多肽鏈在392位氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘基并且在409位
氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘基。
27.根據權利要求26的重組宿主細胞，其中所述宿主細胞還包含編碼共同輕鏈的核酸
序列。
28.一種藥物組合物，其包含權利要求22至25中任一項所述的至少兩種不同的免疫球
蛋白樣分子以及可藥用載體。
29.根據權利要求28的藥物組合物，其中所述至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子是由
根據權利要求26或27的重組宿主細胞產生的。
30.一種用于制備用來產生至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子的宿主細胞的方法，所
述方法包括向所述宿主細胞中引入編碼至少第一含CH3結構域之多肽鏈、第二含CH3結構域
之多肽鏈、第三含CH3結構域之多肽鏈和第四含CH3結構域之多肽鏈的核酸序列，其中所述
第一含CH3結構域之多肽鏈在366位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在351位氨基酸處包
含賴氨酸(K)殘基；并且其中所述第二含CH3結構域之多肽鏈在351位氨基酸處包含天冬氨
酸(D)殘基并且在368位氨基酸處包含谷氨酸(E)殘基；并且其中所述第三含CH3結構域之多
肽鏈在356位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基并且在399位氨基酸處包含賴氨酸(K)殘基；并且
其中所述第四含CH3結構域之多肽鏈在392位氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘基并且在409位
氨基酸處包含天冬氨酸(D)殘基，并且其中將所述核酸序列相繼引入或同時引入。
31.根據權利要求30的方法，其還包括向所述宿主細胞中引入編碼共同輕鏈之核酸序
列的步驟。
32.一種權利要求26或27的重組宿主細胞的培養物或者由根據權利要求30或31的方法
獲得的重組宿主細胞的培養物，其產生至少兩種不同的免疫球蛋白樣分子。
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