本發明涉及凝血因子Ⅶ衍生物，凝血因子Ⅶa衍生物，每個通過將能夠延長血液半衰期的聚合物連接至該衍生物制備的FacⅦ和FacⅦa綴合物，每個通過將載體連接至該綴合物制備的FacⅦ和Ⅶa復合體，編碼FacⅦ和FacⅦa衍生物的基因，包括該基因的表達載體，引入該表達載體的轉化體，使用該轉化體制備FacⅦ和FacⅦa衍生物的方法，制備FacⅦa綴合物和復合體的方法，通過該方法制備的FacⅦa復合體，包括該衍生物、綴合物或復合體作為活性成分的用于預防或治療血友病的藥學組合物，以及包括該衍生物、綴合物或復合體作為活性成分的用于血液凝結的藥學組合物。進一步，本發明涉及預防或治療血友病或促進血液凝結的方法，其包括向對象施用治療有效量的該組合物。本發明的FacⅦ或FacⅦa衍生物能夠結合能夠改進血液半衰期同時保留FacⅦ或FacⅦa活性的載體，并且它們可廣泛地用于開發用于血友病的有效預防或治療試劑。

1.FacⅦ或其活性形式FacⅦa的衍生物，其包括FacⅦ的氨基酸序列SEQ ID NO.4和連
接在其C-末端的肽接頭，其中所述肽接頭的所述C-末端氨基酸殘基是半胱氨酸，并且所述
肽接頭是SOD1的部分序列。
2.根據權利要求1所述的衍生物，其中所述肽接頭在SOD1的部分序列中具有游離半胱
氨酸殘基。
3.根據權利要求1所述的衍生物，其中所述SOD1的部分序列通過用自切割位點序列異
亮氨酸-脯氨酸-精氨酸-異亮氨酸IPRI替換序列中的纈氨酸-亮氨酸-賴氨酸-甘氨酸VLKG
突變。
4.根據權利要求1所述的衍生物，其中所述衍生物由選自下述的氨基酸序列組成：SEQ
ID NOs.9、13、14、20、24和27。
5.一種多核苷酸，其編碼權利要求1至4任一項所述的FacⅦ或其活性形式FacⅦa的衍
生物。
6.根據權利要求5所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸由選自下述的核苷酸序列組成：
SEQ ID NOs.8、12、15、21、25和28。
7.一種表達載體，其包括權利要求5所述的多核苷酸。
8.根據權利要求7所述的表達載體，其中所述載體選自pX0GC-FⅦ-ATKAVC、pX0GC-FⅦ-
GGGGSC、pX0GC-FⅦ-SOD1 1-149、pX0GC-FⅦ-SOD1 IPRI、pX0GC-FⅦ-SOD1 1-25IPRI和
pX0GC-FⅦ-SOD1 1-90IPRI。
9.一種轉化體，其包括權利要求7所述的表達載體。
10.根據權利要求9所述的轉化體，其中所述轉化體由獲取號KCTC12022BP識別。
11.制備FacⅦ衍生物的方法，其包括下述步驟：
(i)培養權利要求9所述的轉化體從而獲得培養液；和
(ii)從所述培養液回收所述FacⅦ衍生物。
12.根據權利要求11所述的方法，進一步包括活化所回收的FacⅦ衍生物的步驟。
13.一種FacⅦ或其活性形式FacⅦa的綴合物，其中將能夠延長血液半衰期的非肽基聚
合物連接至權利要求1至4任一項所述的FacⅦ或其活性形式FacⅦa的衍生物的所述肽接
頭。
14.根據權利要求13所述的綴合物，其中所述非肽基聚合物連接至所述FacⅦ或其活性
形式FacⅦa的衍生物的所述C-末端。
15.根據權利要求13所述的綴合物，其中所述非肽基聚合物具有一種或更多種選自下
述的反應性基團：醛基、丙醛基、丁醛基、馬來酰亞胺基團、鄰位吡啶基二硫化物、硫氫和琥
珀酰亞胺衍生物。
16.根據權利要求15所述的綴合物，其中所述琥珀酰亞胺衍生物是丙酸琥珀酰亞胺酯、
琥珀酰亞胺基羧甲基、羥基琥珀酰亞胺基或碳酸琥珀酰亞胺酯。
17.根據權利要求13所述的綴合物，其中所述非肽基聚合物具有兩個或三個反應性末
端。
18.根據權利要求13所述的綴合物，其中所述非肽基聚合物在兩端分別具有馬來酰亞
胺反應性基團或醛反應性基團。
19.根據權利要求13所述的綴合物，其中所述非肽基聚合物選自聚乙二醇、聚丙二醇、
乙二醇-丙二醇非肽基共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯基乙醚、
生物可降解的聚合物、脂質非肽基聚合物、幾丁質、透明質酸和其組合。
20.一種FacⅦ或其活性形式FacⅦa的復合體，其由經非肽基聚合物連接至免疫球蛋白
Fc區域的權利要求1至4任一項所述的FacⅦ或FacⅦa衍生物組成。
21.根據權利要求20所述的復合體，其中所述非肽基聚合物選自：聚乙二醇、聚丙二醇、
乙二醇-丙二醇共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯基乙醚、生物可
降解的聚合物、脂質聚合物、幾丁質、透明質酸和其組合。
22.根據權利要求20所述的復合體，其中所述非肽基聚合物具有一個、兩個或三個反應
性末端。
23.根據權利要求20所述的復合體，其中所述非肽基聚合物在兩端分別具有馬來酰亞
胺反應性基團或醛反應性基團。
24.根據權利要求20所述的復合體，其中所述免疫球蛋白Fc區域由選自下述的一種至
四種結構域組成：CH1、CH2、CH3和CH4結構域。
25.根據權利要求20所述的復合體，其中所述免疫球蛋白Fc區域進一步包括鉸鏈區域。
26.根據權利要求20所述的復合體，其中所述免疫球蛋白Fc區域源自IgG、IgA、IgD、IgE
或IgM。
27.根據權利要求20所述的復合體，其中所述免疫球蛋白Fc區域是IgG4 Fc區域。
28.根據權利要求20所述的復合體，其中所述免疫球蛋白Fc區域是人去糖基化IgG4 Fc
區域。
29.制備FacⅦa復合體的方法，其包括下述步驟：
(i)在pH 5.0～pH 9.0下，共價連接在其一端具有琥珀酰亞胺衍生物或醛反應性基團
的非肽基聚合物至免疫球蛋白Fc的胺基；
(ii)從步驟(i)的反應混合物回收綴合物，其包括與所述非肽基聚合物在所述胺基處
共價連接的所述免疫球蛋白Fc區域；
(iii)共價連接權利要求1至4任一項所述的FacⅦ衍生物的C-末端硫氫基團至回收的
綴合物中所述非肽基聚合物的另一端，從而產生在所述非肽基聚合物的每個端具有所述免
疫球蛋白Fc區域和所述FacⅦ衍生物的FacⅦ復合體；和
(iv)活化步驟(iii)中產生的所述FacⅦ復合體，從而產生具有經所述非肽基聚合物連
接的FacⅦa和所述免疫球蛋白Fc區域的FacⅦa復合體。
30.一種用于制備FacⅦa復合體的方法，包括下述步驟：
(i)在pH 5.0～pH 9.0下，共價連接在其一端具有琥珀酰亞胺衍生物或醛反應性基團
的非肽基聚合物至免疫球蛋白Fc的胺基；
(ii)從步驟(i)的反應混合物回收綴合物，其包括與所述非肽基聚合物在所述胺基處
共價連接的所述免疫球蛋白Fc區域；和
(iii)共價連接權利要求1至4任一項所述的FacⅦa衍生物的C-末端硫氫基團至回收的
綴合物中所述非肽基聚合物的另一端，從而產生在所述非肽基聚合物的每個端具有所述免
疫球蛋白Fc區域和所述FacⅦa衍生物的FacⅦa復合體。
31.制備FacⅦa綴合物的方法，其包括下述步驟：
(i)共價連接具有反應性基團的非肽基聚合物至權利要求1至4任一項所述的FacⅦ衍
生物的C-末端硫氫基團，所述反應性基團選自：醛基、丙醛基、丁醛基、馬來酰亞胺基團、鄰
位吡啶基二硫化物、硫氫和琥珀酰亞胺衍生物；
(ii)回收通過共價連接所述非肽基聚合物至所述FacⅦ衍生物制備的FacⅦ綴合物；和
(iii)活化所回收的FacⅦ綴合物，從而產生具有連接至所述FacⅦa區域的所述非肽基
聚合物的FacⅦa綴合物。
32.制備FacⅦa綴合物的方法，其包括下述步驟：
(i)共價連接具有反應性基團的非肽基聚合物至權利要求1至4任一項所述的FacⅦa衍
生物的所述C-末端硫氫基團，所述反應性基團選自醛基、丙醛基、丁醛基、馬來酰亞胺基團、
鄰位吡啶基二硫化物、硫氫和琥珀酰亞胺衍生物；和
(ii)回收通過共價連接所述非肽基聚合物至所述FacⅦa衍生物制備的所述FacⅦa綴
合物。
33.一種FacⅦa復合體，其由連接至權利要求31或32所述的回收的FacⅦa綴合物中所
述非肽基聚合物另一端的免疫球蛋白Fc區域組成。
34.根據權利要求29至32任一項所述的方法，其中所述FacⅦ衍生物、FacⅦ綴合物或
FacⅦ復合體的活化通過柱上活化或溶液中活化進行。
35.根據權利要求29至32任一項所述的方法，其中所述非肽基聚合物是聚乙二醇。
36.一種FacⅦa綴合物或FacⅦa復合體，其通過權利要求29至32任一項所述的方法制
備。
37.一種FacⅦ或其活性形式FacⅦa的復合體，其由經非肽基聚合物連接載體的權利要
求1至4任一項所述的FacⅦ衍生物或FacⅦa衍生物組成，所述非肽基聚合物選自：聚乙二
醇、聚丙二醇、乙二醇-丙二醇共聚物、聚氧乙基化多元醇、聚乙烯醇、多糖、葡聚糖、聚乙烯
基乙醚、生物可降解的聚合物、脂質聚合物、幾丁質、透明質酸和其組合。
38.根據權利要求37所述的復合體，其中構成所述FacⅦ復合體或FacⅦa復合體的所述
非肽基聚合物的一端連接至選自抗體、白蛋白、和轉鐵蛋白的載體。
39.根據權利要求37所述的復合體，其中所述載體選自抗體、白蛋白和轉鐵蛋白。
40.根據權利要求37所述的復合體，其中所述非肽基聚合物具有一個、兩個或三個反應
性末端。
41.根據權利要求37所述的復合體，其中所述非肽基聚合物在兩端分別具有馬來酰亞
胺反應性基團或醛反應性基團。
42.用于預防或治療血友病的藥學組合物，其包括作為活性成分的權利要求1至4任一
項所述的FacⅦ衍生物或FacⅦa衍生物、權利要求13至19任一項所述的FacⅦ綴合物或Fac
Ⅶa綴合物、權利要求20至28任一項所述的FacⅦ復合體或FacⅦa復合體或權利要求36所述
的FacⅦa綴合物或FacⅦa復合體。
43.用于促進血液凝結的藥學組合物，其包括作為活性成分的權利要求1至4任一項所
述的FacⅦ衍生物或FacⅦa衍生物、權利要求13至19任一項所述的FacⅦ綴合物或FacⅦa綴
合物、權利要求20至28任一項所述的FacⅦ復合體或FacⅦa復合體或權利要求36所述的Fac
Ⅶa綴合物或FacⅦa復合體。
44.權利要求1至4任一項所述的FacⅦ或其活性形式FacⅦa的衍生物在制備預防或治
療血友病的藥物中的應用。
45.權利要求1至4任一項所述的FacⅦ或其活性形式FacⅦa的衍生物在制備促進血液
凝結的藥物中的應用。