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一種棕色蘑菇三級(jí)菌種擴(kuò)繁體系的建立方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-20
  • 技術(shù)成熟度:通過中試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201110408698.7 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種棕色蘑菇三級(jí)菌種擴(kuò)繁體系的建立方法 
  • 項(xiàng)目單位 天津市金三農(nóng)農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司
  • 發(fā)明人 班立桐,黃亮,王玉,楊麗維,孫茜,孫少起 
  • 行業(yè)類別 藥品-生物藥品
  • 技術(shù)成熟度 通過中試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 秦恩鑫
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-12-20  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明公開了一種棕色蘑菇三級(jí)菌種擴(kuò)繁體系的建立方法,包括母種、液體菌種、栽培種的三級(jí)菌種擴(kuò)繁。其中的母種培養(yǎng)基配方(g/L):草炭土600g,葡萄糖20g,麥粒100g,硫酸鎂1.5g,磷酸二氫鉀1g,蛋白胨2g,水1000mL;液體菌種配方(g/L):馬鈴薯200,葡萄糖20,蛋白胨2,磷酸二氫鉀2,硫酸鎂1,VB10.01,pH自然;栽培種的制作:麥粒土培養(yǎng)基(%):麥粒92,石膏5,草炭土3。采用本發(fā)明的擴(kuò)繁體系較之傳統(tǒng)的固態(tài)三級(jí)菌種,擴(kuò)繁周期縮短了38天。本發(fā)明研究出的棕色蘑菇三級(jí)菌種的最佳擴(kuò)繁方案,對(duì)棕色蘑菇的大規(guī)模工廠化生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)意義。
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  • 02

    說明書

    1.一種棕色蘑菇三級(jí)菌種擴(kuò)繁體系的建立方法,其特征在于它包括母種、液體菌種、栽培種的三級(jí)菌種擴(kuò)繁組合在一起,建立的一種擴(kuò)繁體系,其方法如下:(1)母種的制備:1)母種培養(yǎng)基配方,即草炭土培養(yǎng)基(g/L):草炭土600,葡萄糖20,麥粒100,硫酸鎂1.5,磷酸二氫鉀1,蛋白胨2,水1000mL;2)配制培養(yǎng)基:取適量草炭土、麥粒,加入1000ml的清水中煮沸20~30min,濾液;向?yàn)V液中加入硫酸鎂、磷酸二氫鉀、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂,待藥品溶化后,補(bǔ)足水分,分裝試管;3)滅菌:121℃,滅菌20min,滅菌結(jié)束后,取出擺斜面;4)接種、培養(yǎng):嚴(yán)格按照無菌操作將棕色蘑菇菌絲接種于斜面中部;25℃恒溫培養(yǎng)至滿管;5)挑雜、保存:將染菌、生長狀態(tài)不佳的斜面去除后,將剩余斜面置于4℃冰箱保存,備用;(2)液體菌種的制備:1)液體菌種配方,即種子培養(yǎng)基(g/L):馬鈴薯200,葡萄糖?20,蛋白胨?2,磷酸二氫鉀?2,硫酸鎂?1,VB1?0.01,pH自然;麩皮發(fā)酵培養(yǎng)基為(g/L):麩皮?120,葡萄糖?15,蛋白胨?2,pH自然;2)配制種子液培養(yǎng)基:稱取馬鈴薯處理后,加水煮沸30分鐘,過濾,再加入葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、VB1,充分溶解后趁熱過濾,分裝,50mL/250mL三角瓶;3)滅菌,121℃,滅菌20min;4)制備種子液:滅菌結(jié)束后,取出放涼,嚴(yán)格按照無菌操作接種,取5塊0.5?cm2新鮮斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基中,25℃,150rpm搖床培養(yǎng)7天;5)配制發(fā)酵培養(yǎng)基:取麩皮,加入清水煮沸20-30min,濾液,向麩皮煮液中加入葡萄糖、蛋白胨、硫酸鎂、磷酸二氫鉀,待藥品溶解后,加入清水補(bǔ)足水分,分裝,100mL/250mL三角瓶;6)滅菌:121℃,滅菌20min;7)接種、培養(yǎng):將制備好的種子液以接種量?8%移入裝發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中,25℃,150rpm培養(yǎng)7天,即得棕色蘑菇液體菌種;8)挑雜:每日通過外觀觀察發(fā)酵液是否渾濁,有酸味,則說明被細(xì)菌污染,除去;(3)栽培種的制作:1)麥粒土培養(yǎng)基(%):麥粒92,石膏5,草炭土3;2)煮麥:選擇無蟲蛀的小麥,倒入沸水中煮20~25分鐘,并不斷攪拌,煮至麥粒無白心時(shí),立即停火將麥粒撈出,晾至表面無水跡;3)配料:將石膏、草炭土按比例加入,并將其翻拌均勻,即可裝瓶;  4)裝瓶滅菌:121℃,滅菌2~2.5小時(shí);5)接種:將所制備的液體菌種,以15%的接種量均勻噴入栽培種中,嚴(yán)格按照無菌操作要求操作;6)培養(yǎng):將接種后的栽培種置于25℃恒溫培養(yǎng)室中遮光培養(yǎng),至滿瓶;7)挑雜:將染菌、生長狀態(tài)不佳的栽培種去除后,將剩余菌種保存?zhèn)溆谩?
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專利技術(shù)附圖

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