本發(fā)明公開(kāi)了一種溶桿菌素的純化方法，包括以下步驟：(1)提供生產(chǎn)溶桿菌素的發(fā)酵液；(2)除去發(fā)酵液中的菌體；(3)以XAD1600樹(shù)脂為填料，進(jìn)行第一次吸附層析，以水為流動(dòng)相，收集合并流穿液和洗脫液I；(4)以SP207樹(shù)脂為填料，進(jìn)行第二次吸附層析，以體積濃度大于5％的乙醇溶液為流動(dòng)相，獲得洗脫液II；(5)將洗脫液II濃縮、凍干。本發(fā)明純化方法能夠高效低成本地從枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中純化提取溶桿菌素，最終得率能夠達(dá)到89％，并且所得溶桿菌素純度達(dá)到99％，適用于產(chǎn)業(yè)化分離提取溶桿菌素。

1.一種溶桿菌素的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)提供生產(chǎn)溶桿菌素的發(fā)酵液；
(2)除去發(fā)酵液中的菌體；
(3)以XAD1600樹(shù)脂為填料，進(jìn)行第一次吸附層析，以水為流動(dòng)相，收集合并流穿液和洗
脫液I；
(4)以SP207樹(shù)脂為填料，進(jìn)行第二次吸附層析，以體積濃度大于5％的乙醇溶液為流動(dòng)
相，獲得洗脫液II；
(5)將洗脫液II濃縮、凍干，
所述發(fā)酵液由枯草芽孢桿菌發(fā)酵獲得。
2.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，第一次吸附層析和第二次吸附層析前進(jìn)
行濃縮。
3.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，所述除去發(fā)酵液中的菌體的方法為用陶
瓷膜過(guò)濾器進(jìn)行過(guò)濾。
4.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(3)中，第一次吸附層析洗脫流速為
10～25mL/min，洗脫2.5～5BV。
5.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(4)中，第二次吸附層析洗脫流速為
0.3～1BV/h。
6.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(4)中，第二次吸附層析上樣方法采
用靜態(tài)吸附。
7.如權(quán)利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述靜態(tài)吸附的時(shí)間為100～140min。
8.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(4)中，第二次吸附層析上樣方法采
用動(dòng)態(tài)上樣，上樣體積≤2.5BV。
9.如權(quán)利要求1所述的純化方法，其特征在于，步驟(4)中，洗脫液采用體積濃度10％的
乙醇溶液。