本發(fā)明涉及從湖北山麥冬地下部位提取山麥冬皂苷B的方法，屬于中藥分離純化技術(shù)領(lǐng)域，其具體工藝步驟如下：A.乙醇提?。阂掖蓟亓魈崛『蠛喜⑻崛∫海籅.大孔樹脂富集除雜：將提取液濃縮后上大孔樹脂柱層析，然后薄層層析在線檢測(cè)流出液；C.硅膠柱層析色譜分離：洗脫劑為氯仿-甲醇-水，收集10-15BV的洗脫液；D.重結(jié)晶：洗脫液用甲醇溶解后進(jìn)行重結(jié)晶。本發(fā)明革除了現(xiàn)有技術(shù)中通過葡聚糖凝膠和C18反相柱層析反復(fù)純化的過程，整個(gè)工藝過程操作簡(jiǎn)便，工藝穩(wěn)定，分離過程中主要用到水和乙醇，成本低廉，且液相檢測(cè)產(chǎn)品純度高達(dá)98%以上，可實(shí)現(xiàn)山麥冬皂苷B的大量制備或工業(yè)化生產(chǎn)。

1.一種山麥冬皂苷B的分離純化方法，其特征在于具體工藝步驟如下：A.乙醇提取：取湖北山麥冬地下部位1kg，一次加入50%-70%的乙醇溶液8-12L，回流提取3-5次，每次1.5-3小時(shí)，保持微沸，過濾藥渣后，合并提取液；B.大孔樹脂富集除雜：將步驟A的提取液減壓濃縮至密度1.20-1.40后上大孔樹脂柱層析，先后用水5-8?BV、20%-30%乙醇8-10?BV淋洗除雜，淋洗至流出液變清后，改用60%-70%乙醇4-8?BV洗脫，然后薄層層析在線檢測(cè)流出液，并收集該60%-70%的乙醇洗脫液流份，共收集6個(gè)柱體積；C.硅膠柱層析色譜分離：將步驟B收集到的乙醇洗脫液減壓后，進(jìn)行硅膠柱層析分離，洗脫時(shí)先用氯仿-甲醇-水體積比為10：1：0.05的混合溶劑8-10BV除雜，用同一溶劑繼續(xù)洗脫，收集10-15BV的洗脫液；D.重結(jié)晶：將步驟C收集到的洗脫液用50%-80%的甲醇溶解后進(jìn)行重結(jié)晶，培養(yǎng)晶體時(shí)間為5-10小時(shí)；然后抽濾，濾餅用70%-90%甲醇洗滌后，真空干燥，得到山麥冬皂苷B含量達(dá)98%以上的白色固體產(chǎn)品；步驟B所述薄層層析的展開劑為氯仿：甲醇：水=100:35:5；步驟B所述大孔樹脂為D101型或AB-8型。2.如權(quán)利要求1所述山麥冬皂苷B的分離純化方法，其特征在于步驟D所述重結(jié)晶的溶劑用乙醇、乙酸乙酯或正丁醇中的任意一種替代。3.如權(quán)利要求1所述山麥冬皂苷B的分離純化方法，其特征在于具體工藝步驟如下：取湖北山麥冬地下部位1kg，一次加入50%的乙醇溶液8L，回流提取3次，第一、第二次每次2小時(shí)，第三次1.5小時(shí)，保持微沸，過濾藥渣，合并提取液；提取液濃縮至2L后上D101型大孔樹脂進(jìn)行分離，先后用水5?BV、30%乙醇8BV除雜，淋洗至流出液變清后，改用70%乙醇洗脫，薄層層析檢測(cè)流出液，薄層層析展開劑為氯仿：甲醇：水=100:35:5，收集含有山麥冬皂苷B的部分；減壓濃縮后用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫體系為氯仿：甲醇：水=10:1:0.05，薄層層析進(jìn)行在線檢測(cè)，有樣品流出后開始收集，共收15個(gè)柱體積；減壓濃縮該部分，得到山麥冬皂苷B的粗品；將粗品用50%的甲醇溶解后進(jìn)行重結(jié)晶，培養(yǎng)晶體時(shí)間為5小時(shí)，抽濾，濾餅用90%甲醇洗滌后，真空干燥，得山麥冬皂苷B的白色固體，收率為58.9%，純度為98.6%。4.如權(quán)利要求1所述山麥冬皂苷B的分離純化方法，其特征在于具體工藝步驟如下：取湖北山麥冬地下部位1kg，一次加入70%的乙醇溶液10L，回流提取4次，第一、二次每次2小時(shí)，第三、四次每次1.5小時(shí)，保持微沸，過濾藥渣，合并提取液；提取液濃縮至2L后上D101型大孔樹脂進(jìn)行分離，先后用水6?BV、25%乙醇8?BV除雜，淋洗至流出液變清后，改用60%乙醇洗脫，薄層層析檢測(cè)流出液，薄層層析展開劑為氯仿：甲醇：水=100:35:5，收集含有山麥冬皂苷B的部分；減壓濃縮后用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫體系為氯仿：甲醇：水=20:1:0.05，薄層層析進(jìn)行在線檢測(cè)，有樣品流出后開始收集，共收12個(gè)柱體積；減壓濃縮該部分，得到山麥冬皂苷B的粗品；將粗品用70%的甲醇溶解后進(jìn)行重結(jié)晶，培養(yǎng)晶體時(shí)間為7小時(shí)，抽濾，濾餅用70%甲醇洗滌后，真空干燥，得山麥冬皂苷B的白色固體，收率為55.3%，純度為98.8%。5.如權(quán)利要求1所述山麥冬皂苷B的分離純化方法，其特征在于具體工藝步驟如下：取湖北山麥冬地下部位1?kg，一次加入70%的乙醇溶液12L，回流提取5次，第一、二次每次3小時(shí)，第三、四次每次2小時(shí)，第五次1.5小時(shí)保持微沸，過濾藥渣，合并提取液，提取液濃縮至2L后上AB-8型大孔樹脂進(jìn)行分離，先后用水8BV、20%乙醇8BV除雜，淋洗至流出液變清后，改用65%乙醇洗脫，薄層層析檢測(cè)流出液，薄層層析展開劑為氯仿：甲醇：水=150:35:5，收集含有山麥冬皂苷B的部分；減壓濃縮后用硅膠柱進(jìn)行分離，洗脫體系為氯仿：甲醇：水=10:1:0.05，薄層層析進(jìn)行在線檢測(cè)，有樣品流出后開始收集，共收10個(gè)柱體積；減壓濃縮該部分，得到山麥冬皂苷B的粗品；將粗品用80%的甲醇溶解后進(jìn)行重結(jié)晶，培養(yǎng)晶體時(shí)間為10小時(shí)，抽濾，濾餅用90%甲醇洗滌后，真空干燥，得山麥冬皂苷B的白色固體，收率為53.7%，純度為99.0%。