本發明提供了一種高靈敏檢測過敏原特異性抗體IgE的試劑盒及檢測方法，所述試劑盒主要包括：固化有待測過敏原蛋白的纖維材料膜，雙生物素?鏈霉親和素優化液，生物素偶聯的抗人IgE抗體，生物素或鏈霉親和素標記的多聚酶，以及與所述多聚酶對應的底物顯色劑；本發明試劑盒可高靈敏地定性或半定量地快速檢測人血清或血漿中的過敏原特異性抗體IgE濃度，并可一次篩查數十種過敏原，快速、準確、樣品用量少，適宜進行高通量檢測。

1.一種高靈敏檢測過敏原特異性抗體IgE的試劑盒，包括：固化有待測過敏原蛋白的纖維材料膜，雙生物素-鏈霉親和素優化液，生物素偶聯的抗人IgE抗體，生物素或鏈霉親和素標記的多聚酶，以及與所述多聚酶對應的底物顯色劑；所述雙生物素-鏈霉親和素優化液為雙生物素：鏈霉親和素摩爾濃度比24～39:18的混合物溶液，所述人IgE抗體為羊抗人IgE抗體或兔抗人IgE抗體，所述多聚酶為多聚堿性磷酸酶或多聚辣根過氧化物酶；所述試劑盒高靈敏檢測過敏原特異性抗體IgE的方法包括如下順序步驟：(1)取加液孔內固置有固化有待測過敏原蛋白的纖維材料膜的反應槽，室溫下水平放置，備用；(2)將200～400μL血清或血漿加入1～2mL樣品稀釋液中，混勻后加入反應槽的加液孔內，將反應槽置于混勻器上，室溫孵育30～60分鐘；(3)用洗滌液沖洗反應槽，重復清洗3～5次，每次10～30秒；(4)將200～400μL生物素偶聯的抗人IgE抗體工作液加入1～2mL樣品稀釋液中，混勻后加入反應槽內，置于混勻器上室溫孵育30～60分鐘；(5)用洗滌液沖洗反應槽，重復清洗3～5次，每次10～30秒；(6)在反應槽內加入1～3ml雙生物素-鏈霉親和素優化液，置于混勻器上室溫孵育10～20分鐘；(7)用洗滌液沖洗反應槽，重復清洗3～5次，每次10～30秒；(8)在反應槽內加入1～3ml生物素或鏈霉親和素標記的多聚堿性磷酸酶或多聚辣根過氧化物酶工作液，置于混勻器上室溫孵育10～30分鐘；(9)用洗滌液沖洗反應槽，重復清洗3～5次，每次10～30秒；(10)在反應槽內加入1～2ml稀釋的底物顯色劑溶液，置于混勻器上室溫孵育10～20分鐘；(11)流水沖洗終止酶反應；(12)將反應槽與比色卡比對判讀，或者用閱讀儀進行判讀。2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于所述纖維材料膜固置于反應槽的加液孔中。