1.IL-1β或IL-2或PGE2的單克隆抗體在制備檢測隱性乳房炎試劑盒中的應用,其特征
在于:試劑盒中包含有:預包被與隱性乳房炎相關單克隆抗體的酶標板,其中所述的與隱性
乳房炎相關單克隆抗體為IL-1β或IL-2或PGE2的抗體,
所述預包被與隱性乳房炎相關單克隆抗體的酶標板,制備方法如下:
用0.05M pH9.6的碳酸鹽包被緩沖液將純化的IL-1β或IL-2或PGE2抗體稀釋至蛋白質
含量為2μg/ml,在8×12孔聚苯乙烯酶標板的反應孔中按照每孔0.1ml加入稀釋后的抗體,4
℃過夜孵育,棄去孔內溶液,用洗滌液洗滌三次;用0.5%的牛血清白蛋白37℃封閉1小時,棄
去孔內溶液,用洗滌液洗3次,將包被好的酶標板干燥后放入密封袋或錫袋中備用;
所述試劑盒中還含有包被緩沖液、樣品稀釋液、標準品稀釋液,酶標試劑,濃縮洗滌液,
原倍標準品,顯色劑A液和顯色劑B液以及終止液;
所述的預包被時采用的包被緩沖液為0.05M pH9.6的碳酸鹽緩沖液,其1L溶液中含
1.59gNa2CO3,2.93g NaHCO3;
樣品稀釋液和標準品稀釋液為含有0.5wt%BSA的pH為7.4的0.01mol/L PBS緩沖液;
酶標試劑分別為辣根過氧化物酶標記的IL-1β或IL-2或PGE2抗體;
濃縮洗滌液為含有體積濃度為0.5‰的吐溫-20的0.02mol/L的pH 7.4的磷酸鹽緩沖
液;
原倍標準品分別為96ng/L的IL-1β、640ng/L 的IL-2和1200ng/L的PGE2;
顯色劑A液為雙氧水;
顯色劑B液為底物TMB;
終止液為4 mol/L的硫酸。
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