本發明提供了一種綠色熒光蛋白放射免疫試劑盒及其制備方法和檢測方法。該試劑盒包括放射性核素標記的綠色熒光蛋白、綠色熒光蛋白多克隆抗體、緩沖液A、緩沖液B、PR分離劑和綠色熒光蛋白標準品。應用本發明試劑盒能準確靈敏地檢測動物血液、器官、組織蛋白溶液中的GFP殘留，最低檢測限位1pg/ml。本發明的一抗使用濃度低，樣品的前處理過程簡單，耗時少，能同時檢測大量的樣品，實驗效率高，樣品檢測成本遠低于傳統的儀器檢測方法，對解決大批量樣品的綠色熒光蛋白殘留監控技術具有重要的現實意義。

1.一種綠色熒光蛋白的放射免疫試劑盒，其特征在于，該試劑
盒包括：放射性核素標記的綠色熒光蛋白、綠色熒光蛋白多克隆抗體、
緩沖液A、緩沖液B、PR分離劑和綠色熒光蛋白標準品；
其中，所述放射性核素標記的標記物為¹²⁵I，標記方法為氯胺T法；
所述緩沖液A為0.1M磷酸緩沖液pH7.2；
所述緩沖液B為1％牛血清白蛋白，0.1％冷海魚皮膠，0.05％疊
氮鈉，0.1M磷酸緩沖液pH7.2；
所述PR分離劑為驢抗兔二抗，6％聚乙二醇，γ球蛋白，0.1M磷
酸緩沖液pH7.4；
其中，所述驢抗兔二抗按1：1000稀釋；
其中，所述標準品溶液為9個濃度梯度，具體為1pg/ml，2pg/ml，
4pg/ml，8pg/ml，16pg/ml，32pg/ml，64pg/ml，128pg/ml，256pg/ml；
其中，還包括反應管，所述反應管材料為聚苯乙烯、聚乙烯或聚
丙乙烯。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述反應管的
材料為聚苯乙烯。
3.權利要求1-2中任一項所述的試劑盒在檢測綠色熒光蛋白中
的應用。
4.一種應用權利要求1-2中任一項所述的試劑盒檢測綠色熒光
蛋白的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)樣品前處理
對血液樣本，4℃離心4000rpm，5min，分離血清；
對組織樣本，采用組織蛋白提取液進行組織總蛋白提取；
(2)應用權利要求1-2中任一項所述的試劑盒檢測樣品，測定
沉淀放射性計數；
(3)繪制標準曲線，計算樣品蛋白含量。