本發明公開了一種沙門氏菌LAMP引物組和試劑盒及檢測方法，屬于食品安全的分子生物學檢測方法領域。本發明設計的一種沙門氏菌LAMP引物組包含檢測引物組及內標引物組；檢測試劑盒沙門氏菌LAMP引物組、DNA聚合酶、LAMP反應液、熒光核酸染料、內標、陽性對照和陰性對照。其檢測方法是通過提取待檢樣品，在63～65℃對樣品模板進行30～45min的擴增，不僅可檢測待檢樣品是否含有沙門氏菌，同時可根據檢測內標引物組是否有擴增來判斷是否有假陰性檢測結果。本發明具有快速高效、操作簡便、高特異性、高靈敏度、適合現場檢測等優點，并且可有效防止假陰性的發生，適于推廣應用。

1.一種沙門氏菌LAMP引物組，其特征在于包含檢測引物組及內標引物組；可根據檢測引物組和內標引物組是否有擴增來判斷是否有假陰性沙門氏菌檢測結果；所述的檢測引物組包括一對外引物、一對內引物和一對環引物，其核苷酸序列分別如下所示：SafimI-F3：CACTAAATCCGCCGATCAA；SafimI-B3：CAACGGTGAGGAGGTATTATC；SafimI-FIP：TTCGGATCGCAGTCATTCAGGCGATTGGTGATACGACCG；SafimI-BIP：GGTCAGGCAGATAACACCAACATTGCGGTGGTGCTATTATC；SafimI-LF：TGGTGAAAGGCACCTGTG；SafimI-LB：ATTTGCTGGCTGTCTCCTC；所述的內標引物組包括一對外引物、一對內引物和一對環引物，其核苷酸序列分別如下所示：SainvA-F3：CGAAGCGTACTGGAAAGG；SainvA-B3：ATCACCAATGGTCAGCATG；SainvA-FIP：CCGGCAATAGCGTCACCTTGAAAGCCAGCTTTACGGT；SainvA-BIP：TTGGCGGTATTTCGGTGGGTATAAGTAGACAGGGCGGAG；SainvA-LF：ACTTCATCGCACCGTCAA；SainvA-LB：GACTCGCCATGGTATGGATT。2.一種沙門氏菌LAMP檢測試劑盒，其特征在于由以下組分組成：權利要求1所述的沙門氏菌LAMP引物組；DNA聚合酶；LAMP反應液；核酸熒光染料；內標；陽性對照和陰性對照，所述的DNA聚合酶為Bst?DNA聚合酶；所述LAMP反應液含有8mM?dNTP、10×ThermoPol反應緩沖液和120mM?MgSO₄水溶液三種成分；所述的熒光核酸染料為10×SYBR?Green?I；所述的內標為含有沙門氏菌invA基因片段的T載體克隆；所述的陽性對照為含有沙門氏菌fimI基因片段的T載體克隆；所述的陰性對照為超純水。3.根據權利要求2所述的沙門氏菌LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的含有沙門氏菌invA基因片段的T載體克隆，其制備方法為：以分離鑒定的沙門氏菌為模板，利用內標引物組的外引物SEQ?ID?NO:7和SEQ?ID?NO:8進行擴增，所得invA基因擴增片段序列SEQ?ID?NO:14，回收該擴增片段，利用常規方法連接到T載體中，即獲得含有沙門氏菌invA基因片段的T載體克隆。4.根據權利要求2所述的沙門氏菌LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的含有沙門氏菌fimI基因片段的T載體克隆，通過下述方法制備：以分離鑒定的沙門氏菌為模板，利用檢測引物組的外引物SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:2進行擴增，所得fimI基因擴增片段序列SEQ?ID?NO:13，回收該擴增片段，利用常規方法連接到T載體中，即獲得含有沙門氏菌fimI基因片段的T載體克隆。5.根據權利要求2所述的沙門氏菌LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的沙門氏菌LAMP引物組中檢測引物組及內標引物組的引物濃度的比例如下：外引物、內引物、環引物的摩爾比為：1-2：4-8：2-4。6.根據權利要求2所述的沙門氏菌LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的LAMP反應液中8mM?dNTP、10×ThermoPol反應緩沖液和120mM?MgSO₄水溶液三種成分的體積比是7：4：3。7.權利要求2～6任一項所述的檢測試劑盒的沙門氏菌LAMP檢測方法，其特征在于包括如下步驟：(1)待檢樣品的提取：按照DNA提取試劑盒進行；(2)恒溫基因擴增檢測反應體系及條件：25μl反應體系含有：SafimI-F30.2μM，SafimI-B30.2μM，SafimI-FIP?1.6μM，SafimI-BIP?1.6μM，SafimI-LF0.8μM，SafimI-LB?0.8μM，LAMP反應液12.5μl，DNA聚合酶8U，10×SYBR?Green?I?0.5μl，待檢樣品2μl，用超純水補齊到25μl置于PCR管中；同時設置陽性對照和陰性對照；(3)恒溫基因擴增內標反應體系及條件：25μl反應體系含有：SainvA-F30.2μM，SainvA-B30.2μM，SainvA-FIP?1.6μM，SainvA-BIP?1.6μM，SainvA-LF0.8μM，SainvA-LB?0.8μM，LAMP反應液12.5μl，DNA聚合酶8U，10×SYBR?Green?I?0.5μl，待檢樣品2μl，內標2μl，用超純水補齊到25μl置于PCR管中；同時設置陽性對照和陰性對照；(4)將步驟(2)和(3)配置的含反應體系的PCR管中混勻后離心，置于熒光檢測儀器中于63～65℃反應30～45min，并在80℃持續2min，根據儀器實時讀取的熒光信號來判斷擴增結果，通過待測樣品的檢測反應和內標反應兩?者的擴增結果來判斷檢測結果；待測樣品的檢測反應和內標反應結果全為陽性時，檢測結果為陽性；待測樣品的檢測反應結果為陰性，內標反應結果為陽性時，檢測結果為陰性；待測樣品的檢測反應結果為陽性，內標反應結果為陰性時，檢測結果為陰性；待測樣品的檢測反應結果為陰性，內標反應結果為陰性時，檢測結果可能為假陰性，建議重新提取DNA進行檢測或采用其他方法檢測；所述的沙門氏菌LAMP檢測方法用于非疾病診斷或/和治療目的。8.根據權利要求7所述的沙門氏菌LAMP檢測方法，其特征在于：步驟(4)中所述的熒光檢測儀器為ESE-Quant?Tube?Scanner或熒光PCR儀。