本發明涉及高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基及其應用，可有效解決在同一培養基上既高產氨又高產吲哚乙酸的問題，方法是，由以下重量百分比計的：酵母粉0.25～1%、豆粕粉0.5～2%、NaCL 0.1～1.0%、CuSO0.001～0.005%、色氨酸0.01%～0.15%和余量為水制成，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成質量濃度為10.2115%色氨酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO和水混合均勻，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為7.0～9.0；本發明提供發酵培養基及培養條件簡單，操作方便，生產成本低，氨和吲哚乙酸產量高，易于工業化生產，節能環保，經濟和社會效益巨大。

1.一種巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，方法是，
（1）、菌種的活化：挑取巴西固氮螺菌R斜面保存菌種，在LB培養基平板上三區劃線，置
30℃培養箱中培養24～48h，得活化菌種；
（2）、巴西固氮螺菌R種子液的制備：挑取一環LB培養基活化好的菌種接種于LB液體培
養基中，置 30℃180 r/min搖床培養24～48 h，制得巴西固氮螺菌R種子液；
（3）、接種發酵培養：按接種量為1～5%接種巴西固氮螺菌R種子液于高泌氨高產吲哚乙
酸的發酵培養基中，在培養溫度為30～40℃的條件下，160～200 r/min搖床培養2～6d，即
可得到含氨和吲哚乙酸分別達800～1000 mg/L、200～300mg/L的發酵液；
所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計的：酵
母粉0.25～1%、豆粕粉0.5～2%、NaCL 0.1～1.0%、CuSO₄ 0.001～0.005%、色氨酸0.01%～
0.15%和余量為水制成，其中，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成
質量濃度為10.2115%色氨酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，121℃滅
菌30min，冷卻至室溫，然后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為7.0～9.0；
所述的巴西固氮螺菌R，分類命名為巴西固氮螺菌（Azospirillum brasilense），2012
年4月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為：CGMCC NO
6029，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號；
所述的豆粕粉為大豆榨油后的一級壓榨豆粕粉；所述的水為蒸餾水或純凈水。
2.根據權利要求1所述的巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，其
特征在于，所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計
的：酵母粉0.5～0.8%、豆粕粉0.9-1.6%、NaCL 0.3-0.5%、CuSO₄ 0.002～0.004%、色氨酸
0.06%～0.1%和余量為水制成，其中，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾
除菌，成質量濃度為10.2115%色氨酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，
121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為7.0～9.0。
3.根據權利要求1所述的巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，其
特征在于，所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計
的：酵母粉0.6%、豆粕粉1.25%、NaCL 0.55%、CuSO₄ 0.003%、色氨酸0.08%和余量為水制成，其
中，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成質量濃度為10.2115%色氨
酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然
后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為8.0。
4.根據權利要求1所述的巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，其
特征在于，所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計
的：酵母粉0.3%、豆粕粉1.9%、NaCL 0.2%、CuSO₄ 0.004%、色氨酸0.02%和余量為水制成，其
中，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成質量濃度為10.2115%色氨
酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然
后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為7.5。
5.根據權利要求1所述的巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，其
特征在于，所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計
的：酵母粉0.9%、豆粕粉0.6%、NaCL 0.9%、CuSO₄ 0.002%、色氨酸0.14%和余量為水制成，其
中，先將色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成質量濃度為10.2115%色氨
酸溶液；再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然
后加入色氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為8.5。
6.根據權利要求1所述的巴西固氮螺菌R發酵培養基在高產氨和吲哚乙酸中的應用，其
特征在于，所述的高產氨和吲哚乙酸的巴西固氮螺菌R發酵培養基是，由以下重量百分比計
的：酵母粉0.5%、豆粕粉1%、NaCL 0.4%、CuSO₄ 0.002%、色氨酸0.05%和余量為水，其中，先將
色氨酸用0.01M NaOH溶液溶解，0.22μm濾膜過濾除菌，成質量濃度為10.2115%色氨酸溶液；
再將酵母粉、豆粕粉、NaCL、CuSO₄和水混合均勻，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，然后加入色
氨酸溶液混勻，用鹽酸或NaOH調pH為7.0～9.0。