1.一種山葵脫毒苗的培養方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)切取山葵根莖上生長的芽體的芽尖部分,將其放在超凈工作臺上,
先用0.1%的升汞消毒2~5分鐘,再用無菌水清洗后,接種于促進芽尖快速
生長的培養基MS+KT0.5~1.5mg·L-1+NAA0.3~1.0mg·L-1中,在12~
20℃、每天光照6~12小時、光照強度為1000~1500lx的條件下進行培養;
(2)選取步驟(1)中培養的長度在1.0cm以上的無菌芽體,轉接入
MS+6-BA?1.0~3.0mg·L-1+IAA0.5~2.0mg·L-1+脯氨酸0.5~2%+活性炭
1~3%的培養基中,先在5℃的條件下培養15天,再放在培養箱中進行8~
15天的變溫處理,所述變溫處理是指在8~12℃的條件下培養19小時與在
30~45℃的條件下培養5小時交替進行;
(3)選取生長良好的芽體于解剖鏡下,用解剖針小心剝去芽體外面的
幼葉后,切取帶有1~4個葉原基的芽分生組織,接入叢生芽分化培養基
MS+6-BA1~3mg·L-1+KT0.1~0.5mg·L-1中,在15~22℃、每天光照10~
14小時、光照強度為1000~1500lx的條件下培養;
(4)選取生長的山葵叢生芽,將其分割為單株后轉入壯苗培養基MS+
NAA0.05~0.1mg·L-1+6-BA0.1~0.5mg·L-1+KT0.05~0.2mg·L-1中,在
10~18℃、每天光照10~16小時、光照強度為1000~1500lx的條件下培養;
(5)選取生長健壯的山葵無根苗接入生根培養基White+NAA0.1~1.0
mg·L-1中,在15~22℃、每天光照6~10小時、光照強度為800~1000lx
的條件下誘導生根;
(6)當無根苗長出3~4條以上不定根時,打開瓶蓋,在室內煉苗2~4
天后,將其從培養瓶中取出,用無菌水洗去不定根上的培養基后,移栽至
消毒后的土壤中生長。
2.根據權利要求1所述的一種山葵脫毒苗的培養方法,其特征在于:
步驟(1)中所述芽體的芽尖部分是指芽體上部長度為0.2~0.5cm的芽尖
部分。
3.根據權利要求1所述的一種山葵脫毒苗的培養方法,其特征在于:
步驟(6)中所述土壤是由蛭石和全營養土按2:1配制而成,消毒是指先采
用0.1%多菌靈消毒6~10小時,再用0.1%高錳酸鉀消毒12~24小時。
4.根據權利要求1所述的一種山葵脫毒苗的培養方法,其特征在于:
步驟(6)中煉苗的培養條件為溫度15~20℃和相對濕度80%~95%,移栽
后的培養條件為培養溫度12~20℃、相對濕度為70~80%、每天光照4~
10小時和光照強度為800~1200lx。
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