本發明公開了一種提高挑選多粘菌素正向突變菌株機率的方法，涉及多粘芽抱桿菌篩選差異菌領域。本發明對分離平板培養基添加輕質碳酸鈣，制備成平板后進行低溫冷藏，在分離平板上進行菌株培養，依據單菌落出現的外觀形態轉接到添加有輕質碳酸鈣的斜面培養基培養，將斜面培養基上培養完成后的菌苔接種于種子培養基中培養，即得正向突變率大于50％的菌株。本發明采用對粘桿菌素產生菌進行代謝調控和固體培養基初始濕度進行調節相結合的篩選方法，實現了高產菌落的直觀可區分的篩選方法，提高了粘桿菌素篩選中獲得正向突變菌株的機率，提高了篩選效率。本發明方法工藝簡單、易操作。因而可進行大規模的篩選，獲得較多的高產菌株，進而降低生產成本。

1.一種提高挑選多粘菌素菌株正向突變機率的方法，其特征在于：對分離平板培養基添加輕質碳酸鈣，制備成平板后進行低溫冷藏，在分離平板上進行菌株培養，依據單菌落出現的外觀形態轉接到添加有輕質碳酸鈣的斜面培養基培養，將斜面培養基上培養完成后的菌苔接種于種子培養基中培養，即得正向突變率大于50％的菌株；所述分離平板培養基由以下組份及重量百分比組成：葡萄糖0.5％-1.5％，酵母粉0.5％-1.5％，牛肉膏0.1％-0.5％，氯化鈉0.1％-0.5％，輕質碳酸鈣0.1-0.2％，瓊脂2.2％，水余量；所述分離平板培養基pH6.0-7.2；所述單菌落分為N型菌落和G型菌落，所述N型菌落為粘稠型，所述G型菌落為干癟型，所述G型菌落為高產菌落，直觀的進行操作，挑選出正向突變菌株。2.根據權利要求1所述的一種提高挑選多粘菌素菌株正向突變機率的方法，其特征在于：所述斜面培養基由以下組份及重量百分比組成：葡萄糖0.5％-1.5％，酵母粉0.5％-1.5％，牛肉膏0.1％-0.5％，氯化鈉0.1％-0.5％，輕質碳酸鈣0.1-0.2％，瓊脂2.2％，水余量；所述斜面培養基pH6.0-7.2。3.根據權利要求1-2任一項權利要求所述的一種提高挑選多粘菌素菌株正向突變機率的方法，其特征在于：包括以下步驟：(1)配制無菌的含有輕質碳酸鈣的分離平板培養基，在超凈臺上制成平板，然后在溫度30-35℃的條件下空培3天；(2)將步驟(1)中空培3天后的分離平板培養基放入冰箱，在2-10℃條件下冷藏6-10天；(3)使用無菌水稀釋生產菌株凍存管，選擇稀釋度為10^-3-10^-8的稀釋液，依次涂布于步驟(2)中冷藏后的分離平板培養基上，在溫度為28-35℃，濕度為30％-60％條件下，培養70h-100h，即得N型菌落和G型菌落；(4)挑取步驟(3)中G型菌落，劃線涂布于含有輕質碳酸鈣的斜面培養基上，在溫度為28-35℃，濕度為30％-60％條件下，進行培養，即得菌苔；(5)將步驟(4)中的菌苔刮下接種于種子培養基中，在溫度28.0℃-35.0℃，搖床轉速為190rpm的條件下培養20h-38h，即得正向突變率大于50％的菌株。4.根據權利要求3所述的一種提高挑選多粘菌素菌株正向突變機率的方法，其特征在于：所述種子培養基由以下組份及重量百分比組成：蔗糖1％-2％，酵母粉2％-3％，氯化鈉0.1％-0.5％，磷酸二氫鉀0.05％-0.1％，水余量；所述種子培養基pH6.0-7.0。