本發(fā)明公開了一種睡蓮組織培養(yǎng)的方法，具體操作步驟如下：1)培養(yǎng)基的配制，包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分；2)外植體的選取及消毒；3)不定芽的誘導(dǎo)及增殖；4)生根培養(yǎng)；5)移栽。本發(fā)明有益的效果：本發(fā)明利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對睡蓮進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)，能夠在短時(shí)間內(nèi)獲得大量遺傳性狀一致的優(yōu)質(zhì)壯苗，克服了常規(guī)繁殖方法慢的缺點(diǎn)，同時(shí)對其規(guī)模化生產(chǎn)和種質(zhì)資源保存都具有積極意義。

1.一種睡蓮組織培養(yǎng)的方法，其特征在于：該方法包括如下步驟：
1)、培養(yǎng)基的配制：
(1)基本培養(yǎng)基：采用固液雙層培養(yǎng)基，其上層均為無菌蒸餾水；下層為MS固體培養(yǎng)基，
其中蔗糖20～30g/L，瓊脂5～9g/L，pH＝5.8；
(2)誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體層：MS+TDZ1.0～3.0mg/L+NAA0.05～0.5mg/L+活性炭0.2～0.5mg/L；
(3)增殖培養(yǎng)基固體層：MS+6-BA2.0～4.0mg/L+NAA0.1～0.5mg/L；
(4)生根培養(yǎng)基固體層：MS+NAA0.05～0.2mg/L+IBA0.05～0.2mg/L；
2)外植體的選取與消毒：將睡蓮根莖上的頂芽及側(cè)芽周緣修整光滑，清洗并消毒后備用；
3)不定芽的誘導(dǎo)及增殖：將步驟2)消毒處理后的芽在無菌條件下接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，
經(jīng)1～2個(gè)月后可直接誘導(dǎo)出不定芽，將不定芽轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)一步進(jìn)行增殖；
4)生根培養(yǎng)：將步驟3)增殖獲得的不定芽在無菌條件下切割后轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，
培養(yǎng)15～25天后生根；
5)移栽：將步驟4)生根后睡蓮植株從培養(yǎng)基中取出并清洗，然后移栽至泥水槽中栽培。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的睡蓮組織培養(yǎng)的方法，其特征在于：在所述步驟1)中，所述
的培養(yǎng)基包括基本培養(yǎng)基和組培各階段培養(yǎng)基的組分具體為：
(1)基本培養(yǎng)基：采用固液雙層培養(yǎng)基，其上層均為無菌蒸餾水；下層為MS固體培養(yǎng)基，
其中蔗糖20～30g/L，瓊脂5～9g/L，pH＝5.8；
(2)誘導(dǎo)培養(yǎng)基固體層：MS+TDZ2.0mg/L+NAA0.5mg/L+活性炭0.2mg/L；
(3)增殖培養(yǎng)基固體層：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L；
(4)生根培養(yǎng)基固體層：MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的睡蓮組織培養(yǎng)的方法，其特征在于：在所述步驟2)中，所述
的消毒處理是：挖取睡蓮根莖去除葉片后將頂芽、側(cè)芽連同部分根莖組織切下，用鋒利的刀
片將芽體周緣修整光滑后用飽和洗衣粉溶液浸泡20～60min，然后再用自來水沖洗干凈，接著
依次在體積比濃度為70％的酒精、有效氯濃度為1％的次氯酸鈉溶液和0.1％的升汞溶液中分
別浸泡0.5～1min、4～8min和4～6min，最后用無菌水沖洗3～5次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的睡蓮組織培養(yǎng)的方法，其特征在于：在所述步驟3)中，所述
的不定芽的誘導(dǎo)和增殖為：將消毒處理后的芽體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基的固體層中誘導(dǎo)不定芽萌
出，將誘導(dǎo)出的不定芽切下后轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖。