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PCV2免疫原性組合物和產生這種組合物的方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-08-15
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310199084.1 
  • 技術(專利)名稱 PCV2免疫原性組合物和產生這種組合物的方法 
  • 項目單位 勃林格殷格翰動物保健有限公司
  • 發明人 M·艾希梅厄,G·尼策爾,M·謝弗 
  • 行業類別 藥品-生物藥品
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 錢世英
  • 發布時間 2021-08-15  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及PCV2免疫原性組合物和產生這種組合物的方法,提供了回收2型豬圓環病毒開放閱讀框2表達的蛋白質的改進方法。該方法通常包括以下步驟:將含有開放閱讀框2編碼序列的重組病毒轉染到培養基中生長的細胞中,使該病毒表達開放閱讀框2,回收上清液中表達的蛋白質。應該在感染細胞約5天后開始回收,以表達足量的重組蛋白表達并從細胞分泌到生長培養基中。這種方法避免了分離和回收細胞內重組蛋白所需的昂貴和耗時的提取步驟。本發明還涉及含有所述蛋白或免疫原性組合物的容器、藥盒。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種疫苗,該疫苗含有至少2μg重組PCV2 ORF2蛋白,其中,所述疫苗用于當以一個劑
    量給予豬時能有效減輕PCV2感染相關臨床癥狀嚴重性的方法中,或含有至少2μg重組PCV2
    ORF2蛋白的一個劑量的疫苗,所述疫苗在用于以減輕豬中PCV2感染相關臨床癥狀嚴重性的
    方法中有效;
    其中,所述疫苗含有選自與糖或多元醇的聚烯基醚交聯的丙烯酸的聚合物的佐劑,
    其中所述疫苗包含重組PCV2 ORF2蛋白和一部分細胞培養上清液,所述疫苗通過包含
    以下步驟的方法獲得:
    a)用含有PCV2 ORF2 DNA編碼序列的重組桿狀病毒載體感染培養的易感細胞;
    b)使所述ORF2蛋白由所述重組桿狀病毒載體表達;
    c)收獲含有所述ORF2蛋白的上清液;
    d)通過分離步驟分離細胞碎片;
    e)滅活所述重組桿狀病毒載體;和
    f)添加佐劑。
    2.如權利要求1所述的疫苗,其特征在于,所述佐劑是卡波姆。
    3.如權利要求2所述的疫苗,其特征在于,所述佐劑是卡巴浦爾。
    4.如權利要求1所述的疫苗,其特征在于,所述佐劑含有每劑500μg到5mg的卡巴浦爾。
    5.如權利要求4所述的疫苗,其特征在于,所述佐劑含有每劑750μg到2.5mg的卡巴浦
    爾。
    6.如權利要求1-5中任一項所述的疫苗,其特征在于,所述疫苗含有4μg到200μg的重
    組PCV2 ORF2蛋白。
    7.如權利要求1-5中任一項所述的疫苗,其特征在于,所述疫苗還含有稀釋劑、等滲劑
    和/或穩定劑。
    8.如權利要求7所述的疫苗,其特征在于,所述稀釋劑選自水、鹽水、右旋糖、乙醇和甘
    油;所述等滲劑選自氯化鈉、右旋糖、甘露醇、山梨糖醇和乳糖;所述穩定劑選自白蛋白和乙
    二胺四乙酸的堿金屬鹽。
    9.如權利要求1-5中任一項所述的疫苗,其特征在于,每個劑量包含至少2μg PCV2
    ORF2蛋白和1μg/ml-60μg/ml的慶大霉素和/或硫柳汞。
    10.一種含有容器的藥盒,所述容器含有至少一個劑量的當以一個劑量給予豬時能有
    效減輕PCV2感染相關臨床癥狀嚴重性的免疫原性組合物,其中,一個劑量含有至少2μg重組
    PCV2 ORF2蛋白,所述藥盒還含有說明手冊,所述說明手冊包括將所述一個劑量的所述免疫
    原性組合物經肌肉內注射應用于小豬,以減輕PCV2感染相關臨床癥狀嚴重性的信息;
    其中,所述免疫原性組合物含有選自與糖或多元醇的聚烯基醚交聯的丙烯酸的聚合物
    的佐劑,
    其中所述免疫原性組合物包含重組PCV2 ORF2蛋白和一部分細胞培養上清液,所述免
    疫原性組合物通過包含以下步驟的方法獲得:
    a)用含有PCV2 ORF2 DNA編碼序列的重組桿狀病毒載體感染培養的易感細胞;
    b)使所述ORF2蛋白由所述重組桿狀病毒載體表達;
    c)收獲含有所述ORF2蛋白的上清液;
    d)通過分離步驟分離細胞碎片;
    e)滅活所述重組桿狀病毒載體;和
    f)添加佐劑。
    11.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物含有滅活的桿狀病毒
    和細胞培養上清液。
    12.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述病毒載體通過加入BEI而被滅活。
    13.如權利要求12所述的藥盒,其特征在于,所述BEI用硫代硫酸鈉中和。
    14.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述佐劑是卡波姆。
    15.如權利要求14所述的藥盒,其特征在于,所述佐劑是卡巴浦爾。
    16.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述佐劑含有每劑500μg到5mg的卡巴浦
    爾。
    17.如權利要求16所述的藥盒,其特征在于,所述佐劑含有每劑750μg到2.5mg的卡巴浦
    爾。
    18.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物含有4μg到200μg的重
    組PCV2 ORF2蛋白。
    19.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物在24個月的時間內穩
    定。
    20.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物有效預防PCV-2感染。
    21.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物與含有豬生殖和呼吸
    道綜合征(PRRS)抗原的免疫原性組合物一同給予。
    22.如權利要求21所述的藥盒,其特征在于,所述PRRS抗原是包含在Ingelvac PRRS
    MLV中的抗原。
    23.如權利要求21或22所述的藥盒,其特征在于,當PRRS感染存在時,所述免疫原性組
    合物有效預防PCV2臨床癥狀和疾病表現。
    24.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物有效誘導針對PCV2的
    免疫應答。
    25.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,所述免疫原性組合物是疫苗。
    26.如權利要求25所述的藥盒,其特征在于,所述疫苗還含有稀釋劑、等滲劑和/或穩定
    劑。
    27.如權利要求26所述的藥盒,其特征在于,所述稀釋劑選自水、鹽水、右旋糖、乙醇和
    甘油;所述等滲劑選自氯化鈉、右旋糖、甘露醇、山梨糖醇和乳糖;所述穩定劑選自白蛋白和
    乙二胺四乙酸的堿金屬鹽。
    28.如權利要求10所述的藥盒,其特征在于,每個劑量包含至少2μg PCV2 ORF2蛋白和1
    μg/ml-60μg/ml的慶大霉素和/或硫柳汞。
    29.一種免疫原性組合物,該組合物含有至少2μg重組PCV2 ORF2蛋白,所述組合物用于
    以一個劑量的組合物給予豬以引起針對PCV2的免疫應答;
    其中,所述免疫原性組合物含有選自與糖或多元醇的聚烯基醚交聯的丙烯酸的聚合物
    的佐劑,
    其中所述免疫原性組合物包含重組PCV2 ORF2蛋白和一部分細胞培養上清液,所述免
    疫原性組合物通過包含以下步驟的方法獲得:
    a)用含有PCV2 ORF2 DNA編碼序列的重組桿狀病毒載體感染培養的易感細胞;
    b)使所述ORF2蛋白由所述重組桿狀病毒載體表達;
    c)收獲含有所述ORF2蛋白的上清液;
    d)通過分離步驟分離細胞碎片;
    e)滅活所述重組桿狀病毒載體;和
    f)添加佐劑。
    30.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物含有滅活的
    桿狀病毒和細胞培養上清液。
    31.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述病毒載體通過加入BEI而被
    滅活。
    32.根據權利要求31的免疫原性組合物,其特征在于,所述BEI用硫代硫酸鈉中和。
    33.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述佐劑是卡波姆。
    34.根據權利要求33的免疫原性組合物,其特征在于,所述佐劑是卡巴浦爾。
    35.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述佐劑含有每劑500μg到5mg的
    卡巴浦爾。
    36.根據權利要求35的免疫原性組合物,其特征在于,所述佐劑含有每劑750μg到2.5mg
    的卡巴浦爾。
    37.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物含有4μg到
    200μg的重組PCV2 ORF2蛋白。
    38.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物在24個月的
    時間內穩定。
    39.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物存在于容器
    中。
    40.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物與含有豬生
    殖和呼吸道綜合征(PRRS)抗原的免疫原性組合物一同給予。
    41.根據權利要求40的免疫原性組合物,其特征在于,所述PRRS抗原是包含在Ingelvac
    PRRS MLV中的抗原。
    42.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物是疫苗。
    43.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述組合物用于預防PCV-2引起
    的感染。
    44.根據權利要求40的免疫原性組合物,其特征在于,當PRRS感染存在時,所述免疫原
    性組合物有效預防PCV2臨床癥狀和疾病表現。
    45.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫應答是保護性 免疫應
    答。
    46.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫應答是治療性免疫應
    答。
    47.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,當以一個劑量給予豬時,所述免
    疫原性組合物能有效減少或減輕PCV2感染相關臨床癥狀的嚴重性。
    48.根據權利要求29的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物用于以一個
    劑量給予豬以減少或減輕PCV2感染相關臨床癥狀的嚴重性。
    49.根據權利要求47或48的免疫原性組合物,其特征在于,所述臨床癥狀選自:PCV2感
    染后繼發PMWS的豬總病損、PMWS、消瘦、皮膚蒼白、呼吸窘迫、腹瀉、黃疸、淋巴器官病損、死
    亡、和感染。
    50.根據權利要求49的免疫原性組合物,其中所述感染選自偽狂犬病、豬生殖和呼吸道
    綜合征(PRRS)、Glasser病、鏈球菌性腦膜炎、沙門菌病、斷奶后大腸桿菌病、和化膿性支氣
    管肺炎。
    51.根據權利要求49的免疫原性組合物,其特征在于,所述總病損由全身性淋巴結病與
    以下一種或多種疾病組成:(1)間質性肺炎伴有小葉間水腫、(2)皮膚蒼白或黃疸、(3)斑點
    狀肝萎縮、(4)胃潰瘍和(5)腎炎。
    52.根據權利要求39的免疫原性組合物,其特征在于,所述免疫原性組合物存在于藥盒
    中的容器中,所述藥盒含有說明手冊,所述說明手冊包括將一個劑量的PCV2 ORF2的所述免
    疫原性組合物經肌肉內注射應用于小豬的信息,且其中所述藥盒中的容器還含有豬生殖和
    呼吸道綜合征抗原,所述說明手冊還包括將所述PCV2 ORF2免疫原性組合物與含有所述
    PRRS抗原的免疫原性組合物一同給藥的信息。
    53.如權利要求52所述的免疫原性組合物,其特征在于,所述PRRS抗原是包含在
    Ingelvac PRRS MLV中的抗原。
    54.如權利要求29所述的免疫原性組合物,其特征在于,所述組合物還含有稀釋劑、等
    滲劑和/或穩定劑。
    55.如權利要求54所述的免疫原性組合物,其特征在于,所述稀釋劑選自水、鹽水、右旋
    糖、乙醇和甘油;所述等滲劑選自氯化鈉、右旋糖、甘露醇、山梨糖醇和乳糖;所述穩定劑選
    自白蛋白和乙二胺四乙酸的堿金屬鹽。
    56.如權利要求29所述的免疫原性組合物,其特征在于,每個劑量包含至少2μg PCV2
    ORF2蛋白和1μg/ml-60μg/ml的慶大霉素和/或硫柳汞。
    57.含有至少2μg重組PCV2 ORF2蛋白的免疫原性組合物在制備用于以一個 劑量給予
    豬以誘導針對PCV2的免疫應答的藥劑中的用途;
    其中,所述免疫原性組合物含有選自與糖或多元醇的聚烯基醚交聯的丙烯酸的聚合物
    的佐劑,
    其中所述免疫原性組合物包含重組PCV2 ORF2蛋白和一部分細胞培養上清液,所述免
    疫原性組合物通過包含以下步驟的方法獲得:
    a)用含有PCV2 ORF2 DNA編碼序列的重組桿狀病毒載體感染培養的易感細胞;
    b)使所述ORF2蛋白由所述重組桿狀病毒載體表達;
    c)收獲含有所述ORF2蛋白的上清液;
    d)通過分離步驟分離細胞碎片;
    e)滅活所述重組桿狀病毒載體;和
    f)添加佐劑。
    展開

專利技術附圖

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