1.一組用于表皮葡萄球菌實時熒光PCR檢測的特異性引物和探針,其特征在于:所述特
異性引物和探針的核苷酸序列為(1)或(2)中的一種:
(1)、上游引物:5'- TCGGATCTCCATCAACT -3'
下游引物:5'- TCAAACAACGCAACCAG -3'
探針:5'- TTTTGTCACATCATCCACTGG -3'
所述引物和探針擴增的目標核苷酸序列參見序列表中SEQ ID No.2;
(2)、與(1)所述序列互補的序列。
2.根據權利要求1所述的引物和探針,其特征在于:所述探針的5’端熒光報告基團是
FAM、TET、JOE、HEX或VIC,3’端標記的是熒光淬滅基團TAMRA、DABCYL或BHQ。
3.表皮葡萄球菌的PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述試劑盒為表皮葡萄球菌的定性或
定量檢測試劑盒;所述試劑盒包括權利要求1所述的引物和探針。
4.根據權利要求3所述的表皮葡萄球菌的PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述定量檢測
試劑盒還包括標準品,所述標準品的制備方法為:將表皮葡萄球菌保守基因片段插入到載
體pMD18-T中,轉化至大腸桿菌中進行誘導表達,獲得含有表皮葡萄球菌保守基因片段的重
組質粒,以此作為標準品;所述表皮葡萄球菌保守基因片段為序列表中SEQ ID No.1。
5.根據權利要求4所述的表皮葡萄球菌的PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述表皮葡萄
球菌保守基因片段是以表皮葡萄球菌標準菌株的DNA為模板,使用下述引物進行PCR擴增獲
得的:
上游引物:5'-TTTAACACGCTCTTCACCTG-3'
下游引物:5'- GTAGTCAAACAACGCAACCA -3'。
6.根據權利要求5所述的表皮葡萄球菌的PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述PCR擴增的
條件為:94℃預變性5min;94℃ 30s、60℃ 30s、72℃ 1min,35個循環;72℃ 10min。
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