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檢測11q23/MLL融合基因相對表達量的方法、引物和探針

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-02-02
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310577447.0 
  • 技術(專利)名稱 檢測11q23/MLL融合基因相對表達量的方法、引物和探針 
  • 項目單位 福州艾迪康醫學檢驗所有限公司
  • 發明人 周曉犢,徐建成,王淑一,孫翠蓮 
  • 行業類別 醫療器械-口腔科設備
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 蔣少霆
  • 發布時間 2022-02-02  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了檢測11q23/MLL系列的4種融合基因的方法,以及用于檢測11q23/MLL系列的4種融合基因共計16種融合類型的相對表達量的引物、探針。上述引物和探針經測試特異性好,靈敏度高,操作簡便,利用Taqman探針實時熒光定量PCR的方法,并基于看家基因與目的基因的“雙標準曲線”法分析所得數據,可用于檢測ALL(急性淋巴細胞白血病)、AML(急性粒細胞白血病)和MDS(骨髓增生異常綜合征)患者體內11q23/MLL 系列融合基因mRNA相對表達水平,同時對高危人群進行較為準確的篩查,可有效地節約檢測時間,提高檢測精度。
    展開
  • 02

    說明書

    1.用于檢測11q23/MLL系列的MLL-AF4、MLL-AF6、MLL-AF9和MLL-ENL?4種融合基因相對表達量的引物和探針,其特征在于:所述引物和探針包括:(1)檢測11q23/MLL系列的4種融合基因的共用上游引物MLL-F1、MLL-F2和共用探針P1、P2;其中MLL-F1:CAGCACTGGTCATCCCGCCTC?MLL-F2:CAATAAGCAGGAGAATGCAG?P1:FAM-ACTACAGGACCGCCAAGAAAAGAAGTTCC-TAMRA?P2:FAM-AGCACTCTCTCCAATGGCAATAGTTCTAAG–TAMRA;(2)檢測MLL-AF4的4種融合類型的下游引物AF4-R1、AF4-R2,其中:AF4-R1:CTTCGAGCATGGATGACGT?AF4-R2:GCCATGAATGGGTCATTTC?(3)檢測MLL-AF6的2種融合類型的下游引物AF6-R,其中:AF6-R:CTTTCTCCGCTGACATGCACTTCA?(4)檢測MLL-AF9的6種融合類型的下游引物AF9-R1、AF9-R2、AF9-R3,其中:AF9-R1:GATCTGCTGCAGAATGTGTCT?AF9-R2:GGACTGGGTTGTTCAGAAT?AF9-R3:TGCTGCTGCTGCTGCTGGTAT?(5)檢測MLL-ENL的4種融合類型的下游引物AF9-R1、AF9-R2、AF9-R3,其中:ENL-R1:TTGGACGGGCTTGACTGGG?ENL-R2:GCTTCTTGCGCAGTTGGG?(6)檢測內參基因abl的引物abl-F,abl-R,探針abl-Probe;其中,abl-F:GCCGTGAAGACCTTGAAGGAG?abl-R:ATGATATAGAACGGGGGCTC?abl-Probe:FAM-ACCTGGTGCAGCTCCTTGGG-TAMRA。2.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于:MLL-AF4上游引物、下游引物和探針的摩爾比為2:2:1;MLL-AF6上游引物、下游引物和探針的摩爾比為2:2:1;MLL-AF9上游引物、下游引物和探針的摩爾比為2:2:1;MLL-ENL上游引物、下游引物和探針的摩爾比為2:2:1。3.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于內參基因abl-F:abl-R:abl-Probe的摩爾比為2:2:1。4.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于,所述MLL-AF4的4種融合類型分別是:MLLex8-AF4ex4、MLLex10-AF4ex4、MLLex8-AF4ex7、MLLex10-AF4ex7。5.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于,所述的MLL-AF6的2種融合類型分別是:MLLex8-AF6ex2、MLLex10-AF6ex2。6.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于,所述的MLL-AF9的6種融合類型分別是:MLLex8-AF9ex4、MLLex8-AF9ex5、MLLex8-AF9ex9、MLLex10-AF9ex4、MLLex10-AF9ex5、MLLex10-AF9ex9。7.如權利要求1所述的引物和探針,其特征在于,所述的MLL-ENL的4種融合類型分別是:MLLex8-ENLex2、MLLex8-ENLex7、MLLex10-ENLex2、MLLex10-ENLex7。8.一種非疾病診斷目的的檢測11q23/MLL系列的MLL-AF4、MLL-AF6、MLL-AF9和MLL-ENL?4種融合基因的方法,包括以下步驟:(1)抽提血液中的組織RNA;(2)將RNA反轉為cDNA;(3)檢測體系PCR反應液配置;(4)加樣;(5)檢測;(6)結果讀取;(7)結果報告;其中所述的檢測體系PCR反應液包括:THUNDERBIRD?Probe?qPCR?Mix、ROX?Reference?Dye(50×)、RNase-free?dH2O及上游引物MLL-F1、MLL-F2、探針P1、P2、下游引物AF4-R1、AF4-R2、AF6-R、AF9-R1、AF9-R2、AF9-R3、ENL-R1、ENL-R2,檢測內參基因abl的引物abl-F、abl-R和探針abl-Probe;其中,MLL-F1:CAGCACTGGTCATCCCGCCTCMLL-F2:CAATAAGCAGGAGAATGCAGP1:FAM-ACTACAGGACCGCCAAGAAAAGAAGTTCC-TAMRA?P2:FAM-AGCACTCTCTCCAATGGCAATAGTTCTAAG–TAMRAAF4-R1:CTTCGAGCATGGATGACGTAF4-R2:GCCATGAATGGGTCATTTCAF6-R:CTTTCTCCGCTGACATGCACTTCAAF9-R1:GATCTGCTGCAGAATGTGTCTAF9-R2:GGACTGGGTTGTTCAGAATAF9-R3:TGCTGCTGCTGCTGCTGGTATENL-R1:TTGGACGGGCTTGACTGGGENL-R2:GCTTCTTGCGCAGTTGGGabl-F:GCCGTGAAGACCTTGAAGGAGabl-R:ATGATATAGAACGGGGGCTCabl-Probe:FAM-ACCTGGTGCAGCTCCTTGGG-TAMRA。
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