1.一種可區別地檢測結核性分枝桿菌和非結核性分枝桿菌的組合物,其
包含:
由Seq.No.1堿基序列組成的引物;
由Seq.No.2堿基序列組成的引物;
由Seq.No.3堿基序列~Seq.No.9堿基序列組成的引物;和
由Seq.No.10堿基序列~Seq.No.11堿基序列組成的引物。
2.根據權利要求1所述的組合物,其進一步包含內對照引物。
3.根據權利要求2所述的組合物,其中,所述內對照引物是源自植物的
基因特異性引物。
4.根據權利要求3所述的組合物,其中,所述源自植物的基因是凝集素,
并且所述源自植物的基因特異性引物包括由Seq.No.15堿基序列組成的引物
和由Seq.No.16堿基序列組成的引物。
5.一種檢測結核性分枝桿菌(M.tuberculosis)的組合物,其包含:由Seq.
No.1堿基序列組成的正義引物和由Seq.No.2堿基序列組成的反義引物,作
為特異性針對結核性分枝桿菌的IS6110基因的引物。
6.一種檢測分枝桿菌屬的組合物,其包含:由Seq.No.3堿基序列~Seq.
No.9堿基序列組成的正義引物;由Seq.No.10堿基序列~Seq.No.11堿基
序列組成的反義引物,作為特異性針對分枝桿菌屬ITS基因的引物。
7.根據權利要求6所述的組合物,其中,所述特異性針對分枝桿菌屬
ITS基因的引物形成長度為100bp以下的PCR擴增產物。
8.一種檢測結核性分枝桿菌或分枝桿菌屬的組合物,其
包含由Seq.No.1堿基序列組成的引物;由Seq.No.2堿基序列組成的引
物;由Seq.No.3堿基序列~Seq.No.11堿基序列組成的引物;和
包含選自由Seq.No.12堿基序列組成的探針、由Seq.No.13堿基序列組
成的探針和由Seq.No.14堿基序列組成的探針中的一種或兩種或更多種。
9.根據權利要求8所述的組合物,其中,所述探針用熒光物質在其5’
末端和3’末端標記,并且在5’末端標記的熒光物質和在3’末端標記的熒光物
質相互干擾。
10.根據權利要求9所述的組合物,其中,所述在5’末端標記的熒光物
質選自6-羧基熒光素(FAM)、六氯-6-羧基熒光素(HEX)、四氯-6-羧基熒光素
和花青-5(Cy5)中,而所述在3’末端標記的熒光物質為6-羧基四甲基若丹明
(TAMRA)或黑洞猝滅劑-1,2,3(BHQ-1,2,3)。
11.一種使用實時PCR測定區分、檢測和分析結核性分枝桿菌和分枝桿
菌屬的組合物,其包含:
由Seq.No.1堿基序列組成的引物和由Seq.No.2堿基序列組成的引物;
由Seq.No.3堿基序列~Seq.No.11堿基序列組成的引物;和
由Seq.No.12堿基序列~Seq.No.14堿基序列組成的探針中的一種或兩
種或更多種的探針。
12.根據權利要求11所述的組合物,其進一步包含:
內對照引物;和
內對照探針。
13.根據權利要求12所述的組合物,其中,所述內對照引物為由Seq.No.
15堿基序列組成的正義引物和由Seq.No.16堿基序列組成的反義引物,并且
所述內對照探針為由Seq.No.17堿基序列組成的探針。
14.根據權利要求11所述的組合物,其中,所述組合物包含:
(i)特異性針對結核性分枝桿菌IS6110基因的引物和探針混合物,其包
含:由Seq.No.1堿基序列組成的正義引物和由Seq.No.2堿基序列組成的反
義引物;以及由Seq.No.12堿基序列組成的探針;
(ii)特異性針對分枝桿菌屬ITS基因的引物和探針混合物,其包含:由
Seq.No.3堿基序列~Seq.No.9堿基序列組成的正義引物和由Seq.No.10堿
基序列~Seq.No.11堿基序列組成的反義引物;以及由Seq.No.13堿基序列
組成的探針和/或由Seq.No.14堿基序列組成的探針;
(iii)特異性針對內對照基因的引物和探針混合物,其包含:由Seq.No.15
堿基序列組成的正義引物和由Seq.No.16堿基序列組成的反義引物;以及由
Seq.No.17堿基序列組成的探針;和
(iv)PCR反應混合物,其包含緩沖液、DNA聚合酶、dNTP和無菌蒸餾
水。
15.一種結核性分枝桿菌分析試劑盒,其包含根據權利要求14所述的組
合物。
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