本發(fā)明公開了一株高濃度銨根離子耐受型產(chǎn)丁二酸的大腸桿菌，其分類命名為埃希氏菌屬大腸埃希氏菌（Escherichia coli）BEW308，其保藏編號為：CCTCC NO：M 2013157。本發(fā)明還公開了上述大腸桿菌在丁二酸發(fā)酵生產(chǎn)中的應用。本發(fā)明采用等離子體誘變大腸桿菌，利用含有高濃度銨根離子濃度的合成培養(yǎng)基平板篩選出能夠在厭氧條件下耐受高濃度銨根離子生長的菌體，該菌株可以在厭氧條件下，耐受高濃度的銨根離子，并積累丁二酸。在厭氧搖瓶中，72h菌體密度達到了OD=5.1，丁二酸產(chǎn)量為20.3g/L，而原始出發(fā)菌株在該條件生長極其緩慢，72h菌體OD僅為0.45，產(chǎn)酸量為3.96g/L。相對于出發(fā)菌株，丁二酸產(chǎn)量提高5倍。因此該突變株BEW308具有重大的社會意義和經(jīng)濟價值。

1.一株銨根離子耐受型產(chǎn)丁二酸的大腸桿菌，其特征在于，其分類命名為大腸埃希氏菌（Escherichia?coli）BEW308，其保藏編號為：CCTCC?NO：M?2013157。2.權(quán)利要求1所述的大腸埃希氏菌（Escherichia?coli）BEW308在發(fā)酵生產(chǎn)丁二酸的應用。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應用，其特征在于，具體步驟為：（1）平板培養(yǎng)：將大腸埃希氏菌BEW308接種在平板培養(yǎng)基上厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為37?°C，培養(yǎng)時間為24?h；（2）?種子培養(yǎng)：將平板培養(yǎng)的大腸埃希氏菌BEW308?接種到種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫度為37°C，200?r/min，培養(yǎng)時間為48?h；（3）發(fā)酵生產(chǎn)丁二酸：將種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量2%，100?mL厭氧搖瓶裝液量為30?mL，堿式碳酸鎂作為pH調(diào)節(jié)劑，充二氧化碳2?min；培養(yǎng)溫度為37°C，200?r/min，培養(yǎng)時間為72?h。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于，所述平板培養(yǎng)基配方為：檸檬酸3?g/L，Na₂HPO₄·12H₂O??4g/L，KH₂PO_4?8?g/L，MgSO₄·7H₂O?1?g/L，CaCl₂·2H₂O?10.0?mg/L，ZnSO₄·7H₂O?0.5?mg/L，CuCl₂·2H₂O?0.25?mg/L，MnSO₄·H₂O?2.5?mg/L，CoCl₂·6H₂O?1.75?mg/L，H₃BO_3?0.12?mg/L，Al₂(SO4)₃?1.77?mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O?0.5?mg/L，檸檬酸鐵?16.1?mg/L，瓊脂20g/L，葡萄糖10g/L，以(NH₄)₂HPO₄提供銨根離子并使NH₄⁺濃度為0.5?mol/L，添加量為32?g/L。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于，所述種子培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨?10g/L，酵母粉?5g/L，NaCl?5g/L。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：檸檬酸3?g/L，Na₂HPO₄·12H₂O?4g/L，KH₂PO_4?8?g/L，MgSO₄·7H₂O?1?g/L，CaCl₂·2H₂O?10.0?mg/L，ZnSO₄·7H₂O?0.5?mg/L，CuCl₂·2H₂O?0.25?mg/L，MnSO₄·H₂O?2.5?mg/L，CoCl₂·6H₂O?1.75?mg/L，H₃BO_3?0.12?mg/L，Al₂(SO4)₃?1.77?mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O?0.5?mg/L，檸檬酸鐵?16.1?mg/L，堿式碳酸鎂?24~42g/L，葡萄糖30?~40g/L，以(NH₄)₂HPO₄提供銨根離子并使NH₄⁺濃度為0.5?mol/L，添加量為32?g/L。