本發(fā)明公開(kāi)了一株銨離子耐受型產(chǎn)丁二酸大腸桿菌及其應(yīng)用，其屬于埃希氏菌屬，命名為大腸埃希氏菌BER528（）BER528，其保藏編號(hào)為CCTCC NO：M 2015160。本發(fā)明還公開(kāi)了上述大腸桿菌在丁二酸發(fā)酵生產(chǎn)中的應(yīng)用。本發(fā)明的菌株可以在厭氧條件下，耐受高濃度的銨離子，并積累丁二酸。在外源添加0.53 mol/L NH的厭氧搖瓶發(fā)酵中，72 h菌體DCW為1.82 g/L，丁二酸產(chǎn)量為11.72 g/L，而原始出發(fā)菌株在該條件生長(zhǎng)極其緩慢，72 h菌體DCW僅為1.14 g/L，丁二酸產(chǎn)量為2.56 g/L。相對(duì)于出發(fā)菌株，丁二酸產(chǎn)量提高4.57倍。在5 L發(fā)酵罐中利用氨水調(diào)節(jié)pH厭氧發(fā)酵過(guò)程中，厭氧發(fā)酵90 h，突變株的DCW和最終的丁二酸產(chǎn)量分別為1.22 g/L和27.32 g/L，分別是出發(fā)菌株的1.16倍和1.88倍，因此該突變株BER528具有重大的社會(huì)意義和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

1.一株銨離子耐受型產(chǎn)丁二酸的大腸桿菌，其特征在于，其屬于埃希氏菌屬，命名為大
腸埃希氏菌BER528（Escherichia coli BER528)，已于2015年3月25日保存于中國(guó)典型微生
物保藏中心，地址為中國(guó). 武漢. 武漢大學(xué)，保藏登記號(hào)為CCTCC NO ：M2015160。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的銨離子耐受型產(chǎn)丁二酸的大腸桿菌，其特征在于，所述的銨離
子耐受濃度為0.53 mol/L。
3.權(quán)利要求1所述的銨離子耐受型產(chǎn)丁二酸的大腸桿菌在發(fā)酵生產(chǎn)丁二酸中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，包括如下步驟：
（1）平板培養(yǎng)：將大腸埃希氏菌BER528接種在平板培養(yǎng)基上厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為37 °
C，培養(yǎng)時(shí)間為24 h；
（2）種子培養(yǎng)：將步驟（1）所培養(yǎng)的大腸埃希氏菌BER528 接種到種子培養(yǎng)基中，培養(yǎng)溫
度為37 °C，200 r/min，培養(yǎng)時(shí)間為48 h；
（3）發(fā)酵生產(chǎn)丁二酸：將步驟（2）種子培養(yǎng)液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量2 %，100 mL
厭氧搖瓶裝液量為30 mL，堿式碳酸鎂作為pH調(diào)節(jié)劑，充二氧化碳2 min；培養(yǎng)溫度為37°C，
200 r/min，培養(yǎng)時(shí)間為72 h。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述平板培養(yǎng)基配方為：檸檬酸3 g/L，
Na₂HPO₄·12H₂O 4g/L，KH₂PO₄ 8 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，CaCl₂·2H₂O 10.0 mg/L，ZnSO₄·
7H₂O 0.5 mg/L，CuCl₂·2H₂O 0.25 mg/L，MnSO₄·H₂O 2.5 mg/L，CoCl₂·6H₂O 1.75 mg/L，
H₃BO₃ 0.12 mg/L，Al₂(SO₄ )₃ 1.77 mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.5 mg/L，檸檬酸鐵 16.1 mg/L，
瓊脂 20 g/L，葡萄糖 10 g/L，以(NH₄)₂HPO₄提供銨根離子并使NH₄⁺濃度為0.53 mol/L，添加
量40 g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述種子培養(yǎng)基的配方為：蛋白胨 10 g/
L，酵母粉 5 g/L，NaCl 5 g/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為：檸檬酸 3 g/L，
Na₂HPO₄·12H₂O 4 g/L，KH₂PO₄ 8 g/L，MgSO₄·7H₂O 1 g/L，CaCl₂·2H₂O 10.0 mg/L，ZnSO₄·
7H₂O 0.5 mg/L，CuCl₂·2H₂O 0.25 mg/L，MnSO₄·H₂O 2.5 mg/L，CoCl₂·6H₂O 1.75 mg/L，
H₃BO₃ 0.12 mg/L，Al₂(SO₄ )₃ 1.77 mg/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.5 mg/L，檸檬酸鐵 16.1 mg/L，
堿式碳酸鎂 24~42 g/L，葡萄糖 30 ~40 g/L，以(NH₄)₂HPO₄提供銨離子并使NH₄⁺濃度為0.53
mol/L，添加量40 g/L。