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厚藤IpASR基因及其編碼蛋白和應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-27
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201710661281.9 
  • 技術(專利)名稱 厚藤IpASR基因及其編碼蛋白和應用 
  • 項目單位 中國科學院華南植物園
  • 發明人 張美,張會,簡曙光,夏快飛 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 鄭植垚
  • 發布時間 2021-09-27  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及工程菌釀酒酵母、大腸桿菌和植物分子生物學領域。本發明提供了厚藤鹽脅迫應答相關基因IpASR,其編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其cDNA閱讀框序列如SEQ ID NO.2所示。本發明IpASR基因編碼的脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白IpASR與提高釀酒酵母、大腸桿菌和植物的耐鹽耐旱性相關。通過構建IpASR基因的酵母、大腸桿菌和植物轉基因超表達載體,將IpASR基因在酵母、大腸桿菌和擬南芥中超表達,可以提高酵母、大腸桿菌和擬南芥對鹽脅迫和干旱脅迫的耐受性。該基因可應用于工程菌及植物針對高鹽干旱脅迫的遺傳工程育種,具有很大的應用價值。
    展開
  • 02

    說明書

    1.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白IpASR和/或
    IpASR基因在提高植物對高鹽/干旱的耐受中的應用,所述IpASR基因的cDNA閱讀框為如SEQ
    ID NO.2所示的核苷酸序列,或為與SEQ ID NO.2互補配對的核苷酸序列,或為編碼氨基酸
    序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白的核苷酸序列;所述植物為擬
    南芥。
    2.氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白IpASR和/或
    IpASR基因在農作物轉基因育種中改良農作物對高鹽/干旱耐受性、和/或調控農作物對氧
    化脅迫耐受性的應用,所述IpASR基因的cDNA閱讀框為如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,
    或為與SEQ ID NO.2互補配對的核苷酸序列,或為編碼氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚
    藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白的核苷酸序列;所述農作物為擬南芥。
    3.插入有IpASR基因的釀酒酵母重組表達載體,其特征為,所述IpASR基因的cDNA閱讀
    框為如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,或為與SEQ ID NO.2互補配對的核苷酸序列,或為
    編碼氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤IpASR蛋白的核苷酸序列。
    4.權利要求3所述的釀酒酵母重組表達載體在提高工程菌株釀酒酵母對高鹽和氧化脅
    迫的耐受性中的應用。
    5.插入有IpASR基因的大腸桿菌表達載體,其特征為,所述IpASR基因的cDNA閱讀框為
    如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列,或為與SEQ ID NO.2互補配對的核苷酸序列,或為編碼
    氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的厚藤IpASR蛋白的核苷酸序列。
    6.權利要求5所述的大腸桿菌重組表達載體在提高工程菌大腸桿菌對高鹽和干旱脅迫
    耐受性中的應用。
    7.一種提高擬南芥的耐鹽和/或抗旱性的方法,其特征為,包括以下步驟:
    (1)獲得IpASR基因的cDNA全長,其cDNA閱讀框序列如SEQ ID NO.2所示;
    (2)將含有IpASR的cDNA全長的酵母表達載體pYES-DEST52重組質粒轉化野生型酵母菌
    株W303,分別在含鹽量5%-8.8%的培養基上測試轉基因酵母的耐鹽性;
    (3)以含有IpASR基因cDNA的酵母表達載體pYES-DEST52重組質粒為模板,以引物擴增
    IpASR基因的cDNA全長閱讀框序列,用于獲取插入至擬南芥轉基因超表達載體pMD1的cDNA
    閱讀框片段,用于構建厚藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白轉基因超表達重組載體IpASR-
    pMD1;
    將上述厚藤脫落酸/脅迫/成熟誘導蛋白轉基因超表達重組載體IpASR-pMD1轉化進入
    農桿菌GV3101感受態菌株中,通過擬南芥花序侵染法轉化擬南芥植株,通過Kan抗性篩選獲
    得擬南芥轉基因后代。
    8.根據權利要求7所述的方法,其特征為,步驟(3)中的引物為SEQ ID NO.5和SEQ ID
    NO.6。
    展開

專利技術附圖

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