本發明公開了一種酯酶PHE14及其編碼基因和應用。本發明從海洋假單胞菌(Pseudomonadaceae oryzihabitans)HUP022中開發得到新的酯酶基因PHE14，全長為645bp，其編碼的酯酶PHE14含有214個氨基酸。通過克隆酯酶基因PHE14并將其連接表達載體pET?28a(+)后轉化大腸桿菌BL21(DE3)，培養并誘導表達后，得到了重組表達的酯酶PHE14。酯酶PHE14可用于制備手性乳酸甲酯，利用重組表達的酯酶PHE14作為催化劑，制備得到了光學純度大于99％的(S)?乳酸甲酯。酯酶PHE14在生物化工和生物醫藥等領域具有非常大的應用價值。

1.一種酯酶PHE14，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一種編碼權利要求1所述的酯酶PHE14的酯酶基因。
3.根據權利要求2所述的酯酶基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.權利要求1所述的酯酶PHE14在拆分(±)-乳酸甲酯制備得到(S)-乳酸甲酯中的應
用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，取酯酶PHE14于pH為6.0-10.0的緩沖液中，
再加入(±)-乳酸甲酯，進行反應，得到(S)-乳酸甲酯。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述的緩沖液為選自檸檬酸/檸檬酸鈉、磷
酸緩沖液、Tris/HCl和Gly/NaOH緩沖液中的一種。
7.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，為酯酶PHE14在耐受有機溶劑或表面活性
劑環境下進行催化的應用。
8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的有機溶劑為二氯甲烷、三氯甲烷、正
己烷、環己烷、正庚烷、正辛烷、正葵烷、甲醇、乙醇、正庚醇、正葵醇、丙酮、DMF、DMSO、甲苯或
四氫呋喃。
9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的表面活性劑為Tween-20或三聚磷酸
鈉。