本發(fā)明提供了一種杏丹注射劑的質(zhì)量控制方法，該方法包括杏丹注射劑的指紋圖譜測(cè)試；銀杏葉藥材、銀杏葉提取物、銀杏葉總黃酮醇苷、銀杏葉總萜類內(nèi)酯等成分的鑒別測(cè)試；丹參素或其鈉鹽、原兒茶醛、丹酚酸B或其鎂鹽、丹參酮II、槲皮素、山奈素等成分的含量測(cè)試；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明質(zhì)量控制方法對(duì)以銀杏葉和丹參或其提取物制成的中藥注射劑產(chǎn)品的質(zhì)量控制更為有效，方法精密度、穩(wěn)定性均較高。

1.一種杏丹注射劑的檢測(cè)方法，所述制劑由銀杏葉藥材：丹參藥材=20-80：80-20組方，分別或合并采用水或乙醇溶液提取，然后用沉淀法、柱層析法、溶劑萃取法和超臨界萃取法中的一種或幾種進(jìn)行適當(dāng)精制、混勻，然后制成注射劑；或者由銀杏葉提取物：丹參提取物=20-80：80-20組方制成的注射劑；所述的提取物來源于市售或者采用水提取或采用乙醇溶液提取，然后用沉淀法、柱層析法、溶劑萃取法和超臨界萃取法中的一種或幾種進(jìn)行適當(dāng)精制之后得到；其特征在于：該方法包括以下內(nèi)容：杏丹注射劑的指紋圖譜測(cè)試，包括以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜和以銀杏葉萜類內(nèi)酯成分特征為主的指紋圖譜中的一種或兩種。2.按照權(quán)利要求1所述的杏丹注射劑的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下指紋圖譜中的一種或兩種：a、采用液相色譜法測(cè)試以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜：（1）供試品溶液的制備：取待測(cè)杏丹注射制劑適量，加水或甲醇或乙醇溶解或稀釋，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；（2）參照物溶液的制備：取適量丹參和銀杏葉藥材中的主要活性成分對(duì)照品，包括丹參素鈉、原兒茶醛、丹酚酸B或其鎂鹽、槲皮素、山奈素、異鼠李素中的一種，用水或甲醇或乙醇溶解，定容至合適濃度，作為參照物溶液；（3）色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料：流動(dòng)相為乙腈或甲醇-0.01mol/L～2mol/L磷酸二氫鈉水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸二氫鉀水溶液或0.01mol/L～2mol/L磷酸氫二鈉水溶液或水或0.1％～5％冰醋酸溶液或0.1％～5％甲酸溶液或0.02％～5％磷酸溶液，梯度洗脫，流速為0.5～2.0ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)為190～410nm范圍內(nèi)的一個(gè)或幾個(gè)或蒸發(fā)光檢測(cè)器檢測(cè)，柱溫在20～60℃范圍內(nèi)；（4）標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定：以上述方法作為制定以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段；依據(jù)10批或10批以上供試品所測(cè)得的圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以確定的參照物色譜峰的保留時(shí)間為基準(zhǔn)，計(jì)算其它共有色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中，共有峰有3～50個(gè)；（5）以（1）～（3）所述方法作為待測(cè)杏丹注射劑中以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段，制備待測(cè)樣品的指紋圖譜；（6）將待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與上述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜對(duì)比，應(yīng)符合下列要求：I.計(jì)算待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，應(yīng)為0.80～1.00；II.待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中，非共有峰面積不得超過總峰面積的10％；III.?待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中有5％～60％的共有峰面積的比值與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中各共有峰面積的比值比較，其差值不得大于±50％；b、采用液相色譜法測(cè)試以銀杏葉萜類內(nèi)酯成分特征為主的指紋圖譜：（1）供試品溶液的制備：取待測(cè)杏丹注射制劑適量，加水溶解，加0.2％～30%鹽酸溶液，用醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷萃取，合并萃取液，用0.5％～20％醋酸鈉溶液洗滌，分取醋酸鈉液，用醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷洗滌，合并醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷提取液及洗液，用水洗滌，合并水洗液，用醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷洗滌，合并醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷液，回收醋酸乙酯或正丁醇或三氯甲烷或二氯甲烷至干，殘?jiān)颖蚣状蓟蛞掖际谷芙猓瑩u勻，濾過，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；（2）參照物溶液的制備：取白果內(nèi)酯或銀杏內(nèi)酯A或銀杏內(nèi)酯B或銀杏內(nèi)酯C中的一種，用甲醇或乙醇溶解，定容至合適濃度，作為參照物溶液；（3）色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料：流動(dòng)相A為乙腈或乙腈－四氫呋喃（5～95:95～5）或甲醇或甲醇－四氫呋喃（5～95:95～5），流動(dòng)相B為水或0.1％～5％冰醋酸或0.1％～5％甲酸或0.005％～5％磷酸溶液，梯度洗脫，流速為0.5～2.0ml/min、檢測(cè)波長(zhǎng)為190～410nm范圍內(nèi)的一個(gè)或幾個(gè)或蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，柱溫在20～60℃范圍內(nèi)；（4）標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定：以上述方法作為制定以銀杏葉萜類內(nèi)酯類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段；依據(jù)10批或10批以上供試品所測(cè)得的圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以確定的參照物色譜峰的保留時(shí)間為基準(zhǔn)，計(jì)算其它共有色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中，共有峰有3～30個(gè)；（5）以（1）～（3）所述方法作為待測(cè)杏丹注射劑中以銀杏葉萜類內(nèi)酯類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段，制備待測(cè)樣品的指紋圖譜；（6）將待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與上述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜對(duì)比，應(yīng)符合下列要求中的部分或全部：I.計(jì)算待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，應(yīng)為0.80～1.00；II.待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中，非共有峰面積不得超過總峰面積的10％；III.?待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中有20％～80％的共有峰面積的比值與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中各共有峰面積的比值比較，其差值不得大于±50％。3.按照權(quán)利要求2所述的杏丹注射劑的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下指紋圖譜中的一種或兩種：a、采用液相色譜法測(cè)試以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜：（1）供試品溶液的制備：精密稱取待測(cè)杏丹注射制劑適量，加水制成每1ml含10mg的溶液,用0.45μm的微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；（2）參照物溶液的制備：精密稱取丹參素鈉對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml含15μg的溶液，作為參照物溶液；（3）色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；流動(dòng)相A為0.026％磷酸溶液，流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫，溶劑比例為從0分鐘至30分鐘，流動(dòng)相B的比例由2％升至22％，從30分鐘至60分鐘，流動(dòng)相B的比例由22％升至26％；流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為280±2nm，柱溫為30℃；（4）標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定：以上述方法作為制定以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段；依據(jù)10批或10批以上供試品所測(cè)得的圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以確定的參照物色譜峰的保留時(shí)間為基準(zhǔn)，計(jì)算其它共有色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中，共有峰有3～30個(gè)；（5）以（1）～（3）所述方法作為待測(cè)杏丹注射劑中以丹參和銀杏葉黃酮類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段，制備待測(cè)樣品的指紋圖譜；（6）將待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜與上述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜對(duì)比，應(yīng)符合下列要求：I.計(jì)算待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，應(yīng)為0.90～1.00；II.待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中，非共有峰面積不得超過總峰面積的5％；III.?待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中有10％～40％的共有峰面積的比值與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中各共有峰面積的比值比較，其差值不得大于±30％；b、采用液相色譜法測(cè)試以銀杏葉萜類內(nèi)酯成分特征為主的指紋圖譜：（1）供試品溶液的制備：取待測(cè)杏丹注射制劑1.5g，加水40ml溶解，加2%鹽酸溶液5滴，用醋酸乙酯提取4次，合并提取液，用5％醋酸鈉溶液20ml洗滌，分取醋酸鈉液，用醋酸乙酯10ml洗滌，合并醋酸乙酯提取液及洗液，用水洗滌2次，每次20ml，合并水洗液，用醋酸乙酯10ml洗滌，合并醋酸乙酯液，回收醋酸乙酯至干，殘?jiān)颖m量使溶解并定量轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加丙酮至刻度，搖勻，濾過，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；（2）參照物溶液的制備：取銀杏內(nèi)酯A對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為參照物溶液；（3）色譜條件：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料：流動(dòng)相A為甲醇－四氫呋喃（25:10），流動(dòng)相B為水，梯度洗脫，溶劑比例為從0分鐘至25分鐘，流動(dòng)相B的比例為65％，從25分鐘至60分鐘，流動(dòng)相B的比例由65％降至35％，流速為0.8ml/min、蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，柱溫30℃；（4）標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定：以上述方法作為制定以銀杏葉萜類內(nèi)酯類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段；依據(jù)10批或10批以上供試品所測(cè)得的圖譜，制定標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，以確定的參照物色譜峰的保留時(shí)間為基準(zhǔn)，計(jì)算其它共有色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間，所述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中，共有峰有3～20個(gè)；（5）以（1）～（3）所述方法作為待測(cè)杏丹注射劑中以銀杏葉萜類內(nèi)酯類成分特征為主的指紋圖譜的測(cè)試手段，制備待測(cè)樣品的指紋圖譜；（6）將待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與上述標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜對(duì)比，應(yīng)符合下列要求：I.計(jì)算待測(cè)杏丹注射劑的指紋圖譜與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的相似度，應(yīng)為0.90～1.00；II.待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中，非共有峰面積不得超過總峰面積的5％；III.?待測(cè)杏丹注射劑指紋圖譜中有30％～60％的共有峰面積的比值與標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜中各共有峰面積的比值比較，其差值不得大于±30％。4.按照權(quán)利要求1所述的杏丹注射劑的檢測(cè)方法，其特征在于：所述的注射劑為直接用于注射給藥的注射液、需稀釋后用于靜脈滴注的注射用濃溶液、直接供靜脈滴注的葡萄糖靜脈輸液或氯化鈉靜脈輸液、或者用冷凍干燥法或噴霧干燥法制得的注射用無菌粉末或無菌塊狀物。