本發明公開了一種靶向酵母線粒體的穿梭載體，其是一種用于酵母線粒體復制子、啟動子、蛋白表達等功能研究的線粒體穿梭載體，本發明基于密碼子優化，構建了一種線粒體穿梭載體，利用氯霉素篩選的方法，將線粒體復制子ori5構建到該載體上，驗證了其用于線粒體復制子篩選的功能；結果表明其能夠利用氯霉素篩選轉化到釀酒酵母線粒體中，并檢測到ori5的復制子功能，構建的載體能夠用作靶向酵母線粒體的穿梭載體、線粒體復制子和啟動子的誘捕載體、酵母線粒體復制子和啟動子功能的研究工具。

1.一種靶向酵母線粒體的穿梭載體，其特征在于：包括大腸桿菌的質粒復制子、大腸桿
菌抗性篩選基因、酵母線粒體啟動子、酵母線粒體復制子、酵母線粒體抗性篩選基因；
其中所述酵母線粒體啟動子是p75；
所述酵母線粒體復制子是ori5；
所述酵母抗性篩選基因是氯霉素基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；
所述大腸桿菌抗性篩選基因是氨芐青霉素基因。
2.根據權利要求1所述的靶向酵母線粒體的穿梭載體，其特征在于：大腸桿菌質粒復制
子是pMB1、p15A、pSC101、ColE1或pWV01。
3.根據權利要求1所述的靶向酵母線粒體的穿梭載體，其特征是：靶向酵母線粒體的穿
梭載體核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
4.權利要求1所述靶向酵母線粒體的穿梭載體在酵母線粒體轉化中的應用。