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一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物及試劑盒

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-09-21
  • 技術(shù)成熟度:詳情咨詢
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過(guò)戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201811135986.8 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物及試劑盒 
  • 項(xiàng)目單位 江門(mén)市婦幼保健院
  • 發(fā)明人 唐佳,曾欽龍,徐進(jìn)美,譚潔亮 
  • 行業(yè)類別 健康用品-保健護(hù)理器具
  • 技術(shù)成熟度 詳情咨詢
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 李嘉成
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-09-21  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明公開(kāi)了一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物,包括:(1)針對(duì)MTHFR基因(rs1801133,C677T)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.1所示的上游引物、SEQ ID No.2所示的下游引物和SEQ ID No.3所示的探針;(2)針對(duì)MTHFR基因(rs1801131,A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.4所示的上游引物、SEQ ID No.5所示的下游引物和SEQ ID No.6所示的探針;(3)針對(duì)MTRR基因(rs1801394,A66G)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.7所示的上游引物、SEQ ID No.8所示的下游引物和SEQ ID No.9所示的探針。本發(fā)明還公開(kāi)了所述檢測(cè)引物在制備葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑中的用途及一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明提供的檢測(cè)引物可在單管PCR體系中同時(shí)完成三個(gè)位點(diǎn)的基因分型,操作簡(jiǎn)單方便,特異性強(qiáng),靈敏度高,準(zhǔn)確性高,結(jié)果易于判讀。
    展開(kāi)
  • 02

    說(shuō)明書(shū)

    1.一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物,其特征在于,包括以下引物:(1)針對(duì)MTHFR基因(rs1801133,C677T)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.1所示的上游引物、SEQ ID No.2所示的下游引物和SEQ ID No.3所示的探針;(2)針對(duì)MTHFR基因(rs1801131,A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.4所示的上游引物、SEQ ID No.5所示的下游引物和SEQ ID No.6所示的探針;(3)針對(duì)MTRR基因(rs1801394,A66G)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物:如SEQ ID No.7所示的上游引物、SEQ ID No.8所示的下游引物和SEQ ID No.9所示的探針;所述SEQ ID No.3所示的探針、SEQ ID No.6所示的探針和SEQ ID No.9所示的探針的5’端連接有熒光報(bào)告基團(tuán),3’端連接有熒光猝滅基團(tuán);所述檢測(cè)引物的工作終濃度為:SEQ ID No.1所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQID No.2所示的下游引物0.25-2μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.025-0.3μmol/L;SEQ ID No.4所示的上游引物0.025-0.15μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.25-1.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.05-0.3μmol/L;SEQ ID No.7所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.025-0.3μmol/L。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)引物,其特征在于,所述SEQ ID No.3所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為ROX,3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ2;所述SEQ ID No.6所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為HEX,3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ1;所述SEQ ID No.9所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為FAM,3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物在制備葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑中的用途。4.一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒,其特征在于,包含權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于,還包含以下組分:PCR緩沖液、Mg2+、dNTPs和DNA聚合酶;所述PCR緩沖液包含Tris-HCl和KCl。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于,各組分反應(yīng)時(shí)的終濃度為:Tris-HCl 2-20mmol/L、KCl 10-100nmol/L、Mg2+1.875-5.0mmol/L、dNTPs0.1875-0.5mmol/L、SEQID No.1所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.2所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.025-0.3μmol/L、SEQ ID No.4所示的上游引物0.025-0.15μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.25-1.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.05-0.3μmol/L、SEQ ID No.7所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.025-0.3μmol/L和DNA聚合酶0.025-0.125U/μl。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于,各組分反應(yīng)時(shí)的終濃度為:Tris-HCl 10mmol/L、KCl 50nmol/L、Mg2+3.75mmol/L、dNTPs 0.25mmol/L、SEQ ID No.1所示的上游引物0.0125μmol/L、SEQ ID No.2所示的下游引物0.25μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.05μmol/L、SEQ ID No.4所示的上游引物0.05μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.15μmol/L、SEQ ID No.7所示的上游引物0.0375μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.75μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.05μmol/L和DNA聚合酶0.05U/μl。8.根據(jù)權(quán)利要求4~7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述試劑盒的檢測(cè)程序?yàn)椋?5℃3min;10個(gè)循環(huán):95℃15s、60℃30s、72℃30s;40個(gè)循環(huán):95℃15s、55℃30s收集熒光、72℃30s;1個(gè)循環(huán):95℃3min、45℃2min;1個(gè)循環(huán):45℃1min、80℃15s收集熒光,升溫速率0.06℃/s。9.根據(jù)權(quán)利要求4~7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述試劑盒在用于檢測(cè)時(shí)的結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為:(1)MTHFR基因(rs1801133,C677T)多態(tài)性位點(diǎn)野生型:Ct值小于32;Tm值:68.08±0.99℃,單峰;(2)MTHFR基因(rs1801133,C677T)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型:Ct值小于32;Tm值:(68.08±0.99℃)/(61.77±0.99℃),雙峰;(3)MTHFR基因(rs1801133,C677T)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型:Ct值小于32;Tm值:61.77±0.99℃,單峰;(4)MTHFR基因(rs1801131,A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)野生型:Ct值小于32;Tm值:65.81±0.99℃,單峰;(5)MTHFR基因(rs1801131,A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型:Ct值小于32;Tm值:(65.81±0.99℃)/(72.99±0.99℃),雙峰;(6)MTHFR基因(rs1801131,A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型:Ct值小于32;Tm值:72.99±0.99℃,單峰;(7)MTRR基因(rs1801394,A66G)多態(tài)性位點(diǎn)野生型:Ct值小于32;Tm值:54.47±0.99℃,單峰;(8)MTRR基因(rs1801394,A66G)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型:Ct值小于32;Tm值:(54.47±0.99℃)/(61.03±0.99℃),雙峰;(9)MTRR基因(rs1801394,A66G)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型:Ct值小于32;Tm值:61.03±0.99℃,單峰。
    展開(kāi)

專利技術(shù)附圖

服務(wù)流程

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    個(gè)體戶營(yíng)業(yè)執(zhí)照

  • 身份證

    專利注冊(cè)證原件

  • 專利代理委托書(shū)

    轉(zhuǎn)讓申請(qǐng)書(shū)

    轉(zhuǎn)讓協(xié)議

  • 手續(xù)合格通知書(shū)

    專利證書(shū)

    專利利登記簿副本

安全保障

  • 品類齊全

    海量資源庫(kù),平臺(tái)整合幾十萬(wàn)閑置資源。
  • 交易保障

    完善的資金保障體系確保買(mǎi)賣(mài)雙方資金安全。
  • 專人跟進(jìn)

    專業(yè)交易顧問(wèn)全程服跟進(jìn),確保交易流暢。
  • 快速響應(yīng)

    專業(yè)在線/電話客服服務(wù),快速響應(yīng)貼心服務(wù)。
  • 售后無(wú)憂

    資質(zhì)過(guò)硬,國(guó)內(nèi)大知識(shí)產(chǎn)權(quán)服務(wù)平臺(tái)。
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