本發(fā)明公開(kāi)了一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物，包括：(1)針對(duì)MTHFR基因(rs1801133，C677T)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.1所示的上游引物、SEQ ID No.2所示的下游引物和SEQ ID No.3所示的探針；(2)針對(duì)MTHFR基因(rs1801131，A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.4所示的上游引物、SEQ ID No.5所示的下游引物和SEQ ID No.6所示的探針；(3)針對(duì)MTRR基因(rs1801394，A66G)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.7所示的上游引物、SEQ ID No.8所示的下游引物和SEQ ID No.9所示的探針。本發(fā)明還公開(kāi)了所述檢測(cè)引物在制備葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑中的用途及一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明提供的檢測(cè)引物可在單管PCR體系中同時(shí)完成三個(gè)位點(diǎn)的基因分型，操作簡(jiǎn)單方便，特異性強(qiáng)，靈敏度高，準(zhǔn)確性高，結(jié)果易于判讀。

1.一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)引物，其特征在于，包括以下引物：(1)針對(duì)MTHFR基因(rs1801133，C677T)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.1所示的上游引物、SEQ ID No.2所示的下游引物和SEQ ID No.3所示的探針；(2)針對(duì)MTHFR基因(rs1801131，A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.4所示的上游引物、SEQ ID No.5所示的下游引物和SEQ ID No.6所示的探針；(3)針對(duì)MTRR基因(rs1801394，A66G)多態(tài)性位點(diǎn)的檢測(cè)引物：如SEQ ID No.7所示的上游引物、SEQ ID No.8所示的下游引物和SEQ ID No.9所示的探針；所述SEQ ID No.3所示的探針、SEQ ID No.6所示的探針和SEQ ID No.9所示的探針的5’端連接有熒光報(bào)告基團(tuán)，3’端連接有熒光猝滅基團(tuán)；所述檢測(cè)引物的工作終濃度為：SEQ ID No.1所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQID No.2所示的下游引物0.25-2μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.025-0.3μmol/L；SEQ ID No.4所示的上游引物0.025-0.15μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.25-1.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.05-0.3μmol/L；SEQ ID No.7所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.025-0.3μmol/L。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)引物，其特征在于，所述SEQ ID No.3所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為ROX，3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ2；所述SEQ ID No.6所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為HEX，3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ1；所述SEQ ID No.9所示的探針5’端連接的熒光報(bào)告基團(tuán)為FAM，3’端連接的熒光猝滅基團(tuán)為BHQ1。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物在制備葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑中的用途。4.一種葉酸代謝基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)引物。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，還包含以下組分：PCR緩沖液、Mg²⁺、dNTPs和DNA聚合酶；所述PCR緩沖液包含Tris-HCl和KCl。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，各組分反應(yīng)時(shí)的終濃度為：Tris-HCl 2-20mmol/L、KCl 10-100nmol/L、Mg²⁺1.875-5.0mmol/L、dNTPs0.1875-0.5mmol/L、SEQID No.1所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.2所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.025-0.3μmol/L、SEQ ID No.4所示的上游引物0.025-0.15μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.25-1.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.05-0.3μmol/L、SEQ ID No.7所示的上游引物0.0125-0.1μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.25-2.0μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.025-0.3μmol/L和DNA聚合酶0.025-0.125U/μl。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，各組分反應(yīng)時(shí)的終濃度為：Tris-HCl 10mmol/L、KCl 50nmol/L、Mg²⁺3.75mmol/L、dNTPs 0.25mmol/L、SEQ ID No.1所示的上游引物0.0125μmol/L、SEQ ID No.2所示的下游引物0.25μmol/L、SEQ ID No.3所示的探針0.05μmol/L、SEQ ID No.4所示的上游引物0.05μmol/L、SEQ ID No.5所示的下游引物0.5μmol/L、SEQ ID No.6所示的探針0.15μmol/L、SEQ ID No.7所示的上游引物0.0375μmol/L、SEQ ID No.8所示的下游引物0.75μmol/L、SEQ ID No.9所示的探針0.05μmol/L和DNA聚合酶0.05U/μl。8.根據(jù)權(quán)利要求4～7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的檢測(cè)程序?yàn)椋?5℃3min；10個(gè)循環(huán)：95℃15s、60℃30s、72℃30s；40個(gè)循環(huán)：95℃15s、55℃30s收集熒光、72℃30s；1個(gè)循環(huán)：95℃3min、45℃2min；1個(gè)循環(huán)：45℃1min、80℃15s收集熒光，升溫速率0.06℃/s。9.根據(jù)權(quán)利要求4～7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述試劑盒在用于檢測(cè)時(shí)的結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為：(1)MTHFR基因(rs1801133，C677T)多態(tài)性位點(diǎn)野生型：Ct值小于32；Tm值：68.08±0.99℃，單峰；(2)MTHFR基因(rs1801133，C677T)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型：Ct值小于32；Tm值：(68.08±0.99℃)/(61.77±0.99℃)，雙峰；(3)MTHFR基因(rs1801133，C677T)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型：Ct值小于32；Tm值：61.77±0.99℃，單峰；(4)MTHFR基因(rs1801131，A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)野生型：Ct值小于32；Tm值：65.81±0.99℃，單峰；(5)MTHFR基因(rs1801131，A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型：Ct值小于32；Tm值：(65.81±0.99℃)/(72.99±0.99℃)，雙峰；(6)MTHFR基因(rs1801131，A1298C)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型：Ct值小于32；Tm值：72.99±0.99℃，單峰；(7)MTRR基因(rs1801394，A66G)多態(tài)性位點(diǎn)野生型：Ct值小于32；Tm值：54.47±0.99℃，單峰；(8)MTRR基因(rs1801394，A66G)多態(tài)性位點(diǎn)雜合突變型：Ct值小于32；Tm值：(54.47±0.99℃)/(61.03±0.99℃)，雙峰；(9)MTRR基因(rs1801394，A66G)多態(tài)性位點(diǎn)純合突變型：Ct值小于32；Tm值：61.03±0.99℃，單峰。