本發(fā)明公開(kāi)了一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒，該靶向納米顆粒由PLA-磷脂-PEG納米顆粒和葉酸配體交聯(lián)構(gòu)成；PLA-磷脂-PEG納米顆粒由聚乳酸包裹FeO處于中心作為PLA內(nèi)核，并以磷脂以單層環(huán)繞于該P(yáng)LA內(nèi)核表面，且以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧酸穿插于上述單層磷脂中作為靶向外殼形成；葉酸配體由二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺以及羥基琥珀酰亞胺按一定摩爾比室溫反應(yīng)后與葉酸交聯(lián)形成。其制備方法包括PLA-磷脂-PEG納米顆粒、葉酸配體制備和交聯(lián)成品制備。本發(fā)明顆粒交聯(lián)上葉酸靶向后能夠在靶向識(shí)別葉酸受體過(guò)表達(dá)的腫瘤細(xì)胞，通過(guò)磁鐵吸附分離腫瘤細(xì)胞。

1.一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的靶向納米顆粒由PLA-磷脂-PEG納米顆粒和葉酸配體交聯(lián)構(gòu)成；所述的PLA-磷脂-PEG納米顆粒由聚乳酸包裹Fe₃O₄處于中心作為PLA內(nèi)核，并以磷脂以單層環(huán)繞于該P(yáng)LA內(nèi)核表面，且以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧酸穿插于所述的單層磷脂中作為靶向外殼形成；所述的葉酸配體由二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺以及羥基琥珀酰亞胺按一定摩爾比室溫反應(yīng)后與葉酸交聯(lián)形成；超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法包括以下步驟：a)、在四頸燒瓶中，先加入30mL去離子水，通N₂10min，快速稱(chēng)取6.7573gFeCl₃·6H₂O和3.4753gFeSO₄·7H₂O，加入到反應(yīng)瓶中，攪拌溶解，通過(guò)恒壓滴液漏斗緩慢滴加氨水，并在溫度20^oC至30^oC條件下，機(jī)械劇烈攪拌，至pH9~pH11，共滴加氨水24mL，溶液顏色由紅棕色逐漸變?yōu)楹谏僭谑覝叵聰嚢?5min至35min后,升溫至55^oC至65^oC，反應(yīng)25min至35min，冷卻，用磁鐵分離,倒掉上清液，并用去離子水每次70mL洗三次，并用超聲波分散，再用乙醇每次70mL洗三次，最后加入45mL四甲基氫氧化銨溶解，然后加入二次蒸餾水至250mL，用砂芯漏斗過(guò)濾從而獲得磁流體；b）、取聚乳酸溶于乙氰中,然后加入1mL步驟a中的磁流體，制得含有磁流體的PLA乙氰溶液；c）、取0.06mg二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基、0.24mg大豆卵磷脂，加入至3ml的乙醇水溶液中，加熱攪拌至55℃至70℃，制得混合乙醇水溶液；d）、將1ml步驟b中制得的PLA乙氰溶液逐滴加至3ml步驟c制得的混合乙醇水溶液中，在一定溫度的條件下連續(xù)攪拌1小時(shí)至3小時(shí)，期間允許溶劑揮發(fā)，即得的PLA-磷脂-PEG納米顆粒；e）、將二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺和羥基琥珀酰亞胺按摩爾比1:1:2在室溫反應(yīng)一段時(shí)間后，加入葉酸，獲得葉酸配體；f）、交步驟d中制得的PLA-磷脂-PEG納米顆粒與步驟e中獲得的葉酸配體交聯(lián)，超濾水洗三次，即制得本產(chǎn)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟a中恒壓滴液漏斗緩慢滴加氨水時(shí)，在溫度25^oC條件下，機(jī)械劇烈攪拌至pH10。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟a中再在室溫下攪拌30min后,升溫至60^oC，反應(yīng)30min，冷卻。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟b中PLA乙氰溶液中的PLA濃度為2mg/mL。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟c中乙醇水溶液的濃度為4%，加熱攪拌至65^oC。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟d中的溫度條件為65℃，連續(xù)攪拌時(shí)間為2小時(shí)。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟e中二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-羧基、1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺和羥基琥珀酰亞胺在室溫反應(yīng)15min后，加入葉酸。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超順磁性脂-PLA靶向納米顆粒的制備方法，其特征是：所述的步驟f中PLA-磷脂-PEG納米顆粒與葉酸配體的摩爾比為1:1。