本發(fā)明公開了一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇的方法，步驟如下：1.提取；2.皂化：獲得皂化后的茄尼醇等脂溶性活性成分浸膏；3.葡聚糖凝膠柱分離：分別獲得茄尼醇、維生素E和植物甾醇(混合)、西松烷二萜粗提物；4.硅膠柱層析：通過硅膠柱層析后分別獲得高純茄尼醇、維生素E、植物甾醇；獲得的西松烷二萜通過硅膠柱層析分別獲得α?4，8，13?西柏三烯?1，3?二醇和β?4，8，13?西柏三烯?1，3?二醇。本發(fā)明不僅實(shí)現(xiàn)了煙草脂溶性活性成分的綜合提取，提取脂溶性活性成分后的煙草殘?jiān)€可用于煙草蛋白質(zhì)、綠原酸、蕓香苷、多糖、煙堿的提取，實(shí)現(xiàn)了煙草活性成分的梯次利用，提高了煙草資源尤其是廢棄煙草的利用價(jià)值。

1.一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇的方法，其特征在
于，具體包括如下步驟：
(1)提取：將煙葉去筋、干燥、粉碎，用非極性有機(jī)溶劑提取，非極性有機(jī)溶劑為正己烷
或石油醚，提取液合并，減壓濃縮至浸膏狀，獲得煙草脂溶性粗提物浸膏，同時(shí)回收溶劑；
(2)皂化：將以上步驟獲得的煙草脂溶性粗提物浸膏在堿性條件下進(jìn)行皂化，皂化過程
采用氫氧化鈉和95％乙醇按照質(zhì)液比g/ml為1:60組成的皂化液，皂化完成后，調(diào)pH值至中
性并濃縮除去有機(jī)溶劑，然后加入一定量的水，用非極性有機(jī)溶劑萃取并濃縮至浸膏，所述
非極性有機(jī)溶劑為正己烷或石油醚，獲得茄尼醇脂溶性活性成分混合物；
(3)葡聚糖凝膠柱分離：將以上步驟獲得的脂溶性活性成分混合物以體積比二氯甲烷：
甲醇＝1:1的混合液作為溶解液和洗脫劑通過Sephadex LH20凝膠柱分離，收集洗脫液，分
別獲得茄尼醇粗品、維生素E和植物甾醇混合物、西松烷二萜粗提物；
(4)硅膠柱層析a：步驟(3)獲得的茄尼醇粗品采用石油醚溶解，以石油醚和乙酸乙酯為
洗脫劑進(jìn)一步通過硅膠柱層析進(jìn)行梯度洗脫，并通過結(jié)晶精制后獲得茄尼醇；
(5)硅膠柱層析b：步驟(3)獲得的維生素E和植物甾醇混合物用石油醚溶解，通過硅膠
柱層析，以石油醚和乙酸乙酯為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，在石油醚:乙酸乙酯＝15:1條件下，
收集維生素E餾分；在石油醚:乙酸乙酯＝10:1條件下，收集植物甾醇餾分；
(6)硅膠柱層析c：步驟(3)獲得的西松烷二萜粗提取物通過硅膠柱層析，先用體積比石
油醚：乙酸乙酯＝5:1的混合溶劑洗脫，至無餾分流出，再用體積比石油醚：乙酸乙酯＝3:1
的混合溶劑洗脫，收集第二餾分合并、濃縮，濃縮物進(jìn)一步通過200-300目的硅膠柱層析，以
體積比氯仿：丙酮＝5:1的洗脫劑進(jìn)行分離洗脫，分別獲得抗腫瘤先導(dǎo)化合物——β-4，8，
13-西柏三烯-1，3-二醇和α-4，8，13-西柏三烯-1，3-二醇；
煙葉提取后的殘?jiān)糜诘鞍踪|(zhì)、煙堿、綠原酸、蕓香苷、糖的提取。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(1)中煙葉為烤煙、晾曬煙、香料煙、白肋煙中的任意一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(1)中煙葉的干燥溫度設(shè)置為55-65℃，樣品和提取劑的料液
比為1:6-1:10。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(2)中的皂化過程在60℃條件下加熱回流皂化1h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(3)中通過薄層色譜或液相、氣質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)不同餾分活性成
分。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(3)中獲得的維生素E和植物甾醇混合物直接用于飼料添加
劑或化妝品生產(chǎn)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從煙草中同時(shí)提取茄尼醇、西松烷二萜、維生素E、植物甾醇
的方法，其特征在于，所述步驟(3)獲得的西松烷二萜粗提物直接用于煙草香料。