本發(fā)明公開(kāi)了一種中國(guó)被毛孢蛋白多糖及其制備和應(yīng)用。所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖，由重量百分含量為55℅-60%的多糖和重量百分含量為40℅-45%的蛋白組成；多糖的組成為甘露糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖；甘露糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的物質(zhì)的量之比為6.42-6.51:2.20-2.32：65.85-65.95:2.10-2.18:4.20-4.30。所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖制備方法步驟包括：水提醇沉提取中國(guó)被毛孢粗蛋白多糖，經(jīng)酶-Sevage結(jié)合法去蛋白、透析、陰離子交換層析和凝膠過(guò)濾層析純化，真空冷凍干燥分離純化組分即為中國(guó)被毛孢蛋白多糖。本發(fā)明對(duì)純化后多糖進(jìn)行組分分析、結(jié)構(gòu)鑒定及免疫功能研究，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明中國(guó)被毛孢蛋白多糖有較強(qiáng)的免疫調(diào)節(jié)的活性，是潛在的免疫增強(qiáng)物質(zhì)。

1.一種中國(guó)被毛孢蛋白多糖，其特征在于，由重量百分含量為55％-60％
的多糖和重量百分含量為40％-45％的蛋白組成；所述的多糖的組成為甘露
糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖，多糖的結(jié)構(gòu)單元是以1→3
連接的α-核糖、1→4連接的α-木糖及1→4連接的β-葡萄糖為主鏈，而在β-
葡萄糖的C6位上分別被β-半乳糖和β-甘露糖取代、α-阿拉伯糖為末端基；
所述的甘露糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的物質(zhì)的量之比為
6.47:2.27:65.89:16.17:2.13:4.26；
所述的α-核糖為α-D-核糖，α-木糖為α-D-木糖，β-葡萄糖為β-D-葡萄糖，
β-半乳糖為β-D-半乳糖，β-甘露糖為β-D-甘露糖，α-阿拉伯糖為α-L-阿拉
伯糖；
所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖的平均分子量為40KDa-50KDa；
所述的蛋白多糖具有如結(jié)構(gòu)式Ⅰ所示的結(jié)構(gòu)單元：

2.一種中國(guó)被毛孢蛋白多糖，其特征在于，由重量百分含量為55％-60％
的多糖和重量百分含量為40％-45％的蛋白組成；所述的多糖的組成為甘露
糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖，多糖的結(jié)構(gòu)單元是以1→3
連接的α-核糖、1→4連接的α-木糖及1→4連接的β-葡萄糖為主鏈，而在β-
葡萄糖的C6位上分別被β-半乳糖和β-甘露糖取代、α-阿拉伯糖為末端基；
所述的甘露糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的物質(zhì)的量之比為
6.42:2.20:65.95:16.10:2.10:4.30；
所述的α-核糖為α-D-核糖，α-木糖為α-D-木糖，β-葡萄糖為β-D-葡萄糖，
β-半乳糖為β-D-半乳糖，β-甘露糖為β-D-甘露糖，α-阿拉伯糖為α-L-阿拉
伯糖；
所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖的平均分子量為40KDa-50KDa；
所述的蛋白多糖具有如結(jié)構(gòu)式Ⅰ所示的結(jié)構(gòu)單元：

3.一種中國(guó)被毛孢蛋白多糖，其特征在于，由重量百分含量為55％-60％
的多糖和重量百分含量為40％-45％的蛋白組成；所述的多糖的組成為甘露
糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖，多糖的結(jié)構(gòu)單元是以1→3
連接的α-核糖、1→4連接的α-木糖及1→4連接的β-葡萄糖為主鏈，而在β-
葡萄糖的C6位上分別被β-半乳糖和β-甘露糖取代、α-阿拉伯糖為末端基；
所述的甘露糖、核糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的物質(zhì)的量之比為
6.51:2.32:65.85:16.23:2.18:4.20；
所述的α-核糖為α-D-核糖，α-木糖為α-D-木糖，β-葡萄糖為β-D-葡萄糖，
β-半乳糖為β-D-半乳糖，β-甘露糖為β-D-甘露糖，α-阿拉伯糖為α-L-阿拉
伯糖；
所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖的平均分子量為40KDa-50KDa；
所述的蛋白多糖具有如結(jié)構(gòu)式Ⅰ所示的結(jié)構(gòu)單元：

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖的制備方法，
其特征在于，包括步驟：
(1)深層發(fā)酵：在培養(yǎng)基中接入中國(guó)被毛孢菌種，接種量5％-10％，在
15-22℃條件下，靜置培養(yǎng)30-50天，得到中國(guó)被毛孢發(fā)酵液；其中所用的培
養(yǎng)基包含：葡萄糖15％-25％，蛋白胨3％-7％，蟬蛹粉6％-12％，KH₂PO₄
0.6％-1.2％，MgSO₄.7H₂O?0.1％-1.0％；％為重量百分比；
(2)醇沉：將步驟(1)中的中國(guó)被毛孢發(fā)酵液濃縮，得到濃縮液，再
加入乙醇水溶液，攪拌混勻，沉淀過(guò)夜，離心，取離心所得沉淀得到一次中
國(guó)被毛孢粗多糖；
(3)去蛋白：將步驟(2)所得的一次中國(guó)被毛孢粗多糖的水溶液用蛋
白酶酶解，滅酶并離心除去變性蛋白和酶，離心所得上清液再用有機(jī)溶劑離
心除去下層有機(jī)相和中間的蛋白層，重復(fù)用有機(jī)溶劑離心的步驟直至無(wú)白色
沉淀產(chǎn)生，得到提取液；
(4)透析：步驟(3)所得的提取液用孔徑為6000Da-10000Da的透析
袋在去離子水中透析，收集透析后的提取液，真空冷凍干燥得二次中國(guó)被毛
孢粗多糖；
(5)純化：將步驟(4)得到的二次中國(guó)被毛孢粗多糖用去離子水溶解
得到二次中國(guó)被毛孢粗多糖水溶液，經(jīng)二乙氨基乙基纖維素-52(DEAE纖維
素-52)離子交換層析柱層析，收集的洗脫液用苯酚-硫酸法檢測(cè)多糖和用
lowry法檢測(cè)蛋白，收集第二洗脫峰的洗脫液經(jīng)凝膠過(guò)濾層析，凝膠過(guò)濾層
析所收集的洗脫液用苯酚-硫酸法和lowry法檢測(cè)多糖和蛋白峰，收集共同含
蛋白多糖的洗脫液，經(jīng)濃縮、透析和凍干得到白色疏松絮狀中國(guó)被毛孢蛋白
多糖，命名為HS002-II。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述
的乙醇水溶液的用量為濃縮液體積的4倍-5倍；所述的乙醇水溶液的體積百
分濃度為90％-96％。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述
的蛋白酶為胰蛋白酶；所述的蛋白酶的重量為一次中國(guó)被毛孢粗多糖重量的
1％-2％。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述
的有機(jī)溶劑為氯仿和正丁醇，其中氯仿和正丁醇的體積比為4:1。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，步驟(5)中，所述
的二次中國(guó)被毛孢粗多糖水溶液的濃度為3mg/mL-25mg/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖的應(yīng)用，其特
征在于，所述的中國(guó)被毛孢蛋白多糖在制備免疫調(diào)節(jié)劑中的應(yīng)用。