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一種真菌纖維素酶酶系組成/特性調控基因的應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-30
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201310142896.2 
  • 技術(專利)名稱 一種真菌纖維素酶酶系組成/特性調控基因的應用 
  • 項目單位 山東大學
  • 發明人 王明鈺,趙秋爽,方詡,侯少麗 
  • 行業類別 其他領域
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 尤滄海
  • 發布時間 2021-09-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種真菌纖維素酶酶系組成/特性調控基因的應用。將里氏木霉中的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段敲除后,插入尿苷篩選標記,然后經固態發酵后,制得高活性真菌纖維素酶系。本發明通過敲除盒取代該真菌纖維素酶酶活調控基因后,在固態發酵下,相比原初發菌株,外切葡聚糖甘酶比活力提高2.5倍,β-葡萄糖苷酶比活力提高3倍,調整了真菌胞外纖維素酶酶系,可以適用于不同領域的需求。
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  • 02

    說明書

    1.一種核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的真菌纖維素酶酶活調控基因在制備高活性真菌纖維素酶系中的應用,將里氏木霉中的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的基因片段敲除后,插入尿苷篩選標記,然后經固態發酵后,制得高活性真菌纖維素酶系;具體步驟如下:將核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示基因片段轉化入里氏木霉中,轉化的同時敲除了里氏木霉中核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示的基因片段,制得轉基因里氏木霉,然后在固體培養基中,28~32℃培養4~6天,用pH4.8、濃度為0.05?mol/L檸檬酸緩沖液浸泡菌體2~3h,經離心分離,取上清,制得高活性真菌纖維素酶系;所述里氏木霉為里氏木霉QM9414△Ku70菌株,菌種保藏編號:26921,購自美國菌種保藏中心。2.如權利要求1所述的應用,其特征在于,所述固體培養基組分如下,每十五克組分如下:麩皮2g,(NH42SO4?0.5g,KH2PO4?1.5g,MgSO4?0.06g,CaCl2?0.06g,微晶纖維素?2g,余量水。3.?如權利要求1所述的應用,其特征在于,所述的離心,條件為12000rpm離心10min。
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