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成纖維細胞及其制備方法和應用、細胞分泌液及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-07-23
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610281684.6 
  • 技術(專利)名稱 成纖維細胞及其制備方法和應用、細胞分泌液及其應用 
  • 項目單位 湖南光琇高新生命科技有限公司
  • 發明人 盧光琇,彭琳,謝平原,覃琴 
  • 行業類別 藥品-中藥
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱豪
  • 發布時間 2021-07-23  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種人胚胎干細胞來源的成纖維細胞及其制備方法和應用、細胞分泌液及其應用。該成纖維細胞可分泌多種與創傷愈合有關的細胞生長因子,可應用在制備創傷愈合藥物中。該成纖維細胞的細胞分泌液中含有堿性成纖維細胞生長因子、血管內皮生長因子和轉化生長因子?β1中的一種或多種與創傷愈合有關的細胞生長因子。動物試驗表明,該成纖維細胞的細胞分泌液能夠促進創傷愈合,具有良好的治療效果。該成纖維細胞及其細胞分泌液可應用在創傷愈合藥物中。
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  • 02

    說明書

    1.一種成纖維細胞,其特征在于,保藏號為CCTCC NO:C201684。2.如權利要求1所述的成纖維細胞在制備創傷愈合藥物中的應用。3.一種成纖維細胞的細胞分泌液,其特征在于,所述細胞分泌液通過以下制備方法獲得:用細胞培養基培養如權利要求1所述的成纖維細胞,得到細胞培養液;以及收集所述細胞培養液中的上清,得到所述細胞分泌液。4.根據權利要求3所述的成纖維細胞的細胞分泌液,其特征在于,所述細胞分泌液中包括堿性成纖維細胞生長因子、血管內皮生長因子和轉化生長因子-β1中的一種或多種。5.根據權利要求3所述的成纖維細胞的細胞分泌液,其特征在于,所述細胞培養基包括基礎培養基和細胞生長激素,所述基礎培養基為DMEM/F12培養基,所述細胞生長激素包括胎牛血清、腺嘌呤和胰島素;所述胎牛血清在所述細胞培養基中的體積百分含量為5%~10%,所述腺嘌呤在所述細胞培養基中的濃度為0.1mmol/L~0.2mmol/L,所述胰島素在所述細胞培養基中的濃度為2μg/mL~8μg/mL。6.如權利要求3~5中任一項所述的細胞分泌液在制備創傷愈合藥物中的應用。7.一種成纖維細胞的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:提供飼養層細胞,預先用固定劑將所述飼養層細胞固定,所述固定劑為4%的多聚甲醛,然后將未分化的胚胎干細胞移植至所述飼養層細胞上;以及將所述胚胎干細胞和所述飼養層細胞置于誘導培養基中培養,誘導所述胚胎干細胞分化得到所述成纖維細胞;誘導所述胚胎干細胞分化得到所述成纖維細胞的操作具體為:將所述胚胎干細胞和所述飼養層細胞置于誘導培養基中培養21天~28天,培養的第4天~7天,在誘導培養基中額外添加人源骨形成蛋白-4,繼續培養后得到所述成纖維細胞;其中,所述誘導培養基包括基礎培養基和細胞生長激素,所述基礎培養基為DMEM/F12培養基,所述細胞生長激素包括胎牛血清、腺嘌呤、胰島素和氫化可的松。8.根據權利要求7所述的成纖維細胞的制備方法,其特征在于,所述未分化的胚胎干細胞為未分化的人類胚胎干細胞,所述飼養層細胞為有絲分裂滅活的小鼠成纖維細胞。9.根據權利要求7所述的成纖維細胞的制備方法,其特征在于,所述胎牛血清在所述誘導培養基中的體積百分含量為5%~10%,所述腺嘌呤在所述誘導培養基中的濃度為0.1mmol/L~0.2mmol/L,所述胰島素在所述誘導培養基中的濃度為2μg/mL~8μg/mL,所述氫化可的松在所述誘導培養基中的濃度為0.3μg/mL~0.7μg/mL,所述人源骨形成蛋白-4在所述誘導培養基中的濃度為0.3nmol/L~0.7nmol/L。
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