1.用于雙表位展示的噬菌體載體，為含有源自絲狀噬菌體的用于展示外源肽1的pⅢ蛋
白和用于展示外源肽2的pⅧ蛋白的編碼基因的環形載體；
所述pⅢ蛋白的編碼基因源自噬菌體載體fUSE55；所述pⅧ蛋白的編碼基因源自噬菌體
載體f88-4；
所述用于雙表位展示的噬菌體載體，是按照包括如下步驟的方法制備獲得的：
(1)以噬菌體載體f88-4為模板，采用引物1和引物2進行PCR擴增，得到PCR產物；
所述引物1為根據所述噬菌體載體f88-4上酶切位點MscI上游的序列設計的正向引物；
所述引物2為根據所述菌體載體f88-4上酶切位點SacII下游的序列設計的反向引物；
(2)用限制性內切酶MscI和SacII雙酶切步驟(1)所得PCR產物，將酶切產物膠回收后與
經過限制性內切酶MscI和SacII雙酶切的噬菌體載體fUSE55的骨架片段相連，得到所述用
于雙表位展示的噬菌體載體。
2.根據權利要求1所述的用于雙表位展示的噬菌體載體，其特征在于：所述pⅢ蛋白的
編碼基因為序列表中序列1的第1589-2876位；所述pⅧ蛋白的編碼基因為序列表中序列1的
第5771-6001位。
3.根據權利要求1或2所述的用于雙表位展示的噬菌體載體，其特征在于：所述用于雙
表位展示的噬菌體載體的序列為序列表中序列1。
4.制備權利要求1-3中任一所述的用于雙表位展示的噬菌體載體的方法，包括如下步
驟：
(1)以噬菌體載體f88-4為模板，采用引物1和引物2進行PCR擴增，得到PCR產物；
所述引物1為根據所述噬菌體載體f88-4上酶切位點MscI上游的序列設計的正向引物；
所述引物2為根據所述菌體載體f88-4上酶切位點SacII下游的序列設計的反向引物；
(2)用限制性內切酶MscI和SacII雙酶切步驟(1)所得PCR產物，將酶切產物膠回收后與
經過限制性內切酶MscI和SacII雙酶切的噬菌體載體fUSE55的骨架片段相連，得到所述用
于雙表位展示的噬菌體載體。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：所述引物1為序列表中序列2所示單鏈DNA
分子；所述引物2為序列表中序列3所示單鏈DNA分子。
6.權利要求1-3中任一所述的用于雙表位展示的噬菌體載體在展示兩種不同外源肽中
的應用。
7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述應用中，所述兩種不同外源肽分別直
接融合于權利要求1或2中所述的pⅢ蛋白的氨基末端以及權利要求1或2中所述的pⅧ蛋白
的氨基末端。
8.利用權利要求1-3中任一所述的用于雙表位展示的噬菌體載體展示兩種不同外源肽
的方法，包括如下步驟：
(a)將所述兩種不同外源肽的編碼基因分別插入到權利要求1或2中所述的pⅢ蛋白的
編碼基因的兩個酶切位點BglI之間，以及權利要求1或2中所述的pⅧ蛋白的編碼基因的酶
切位點PstI和Hind III之間，得到重組噬菌體載體；
(b)利用步驟(a)得到的所述重組噬菌體載體包裝得到重組噬菌體；所述重組噬菌體上
展示所述兩種不同外源肽。
9.利用權利要求8所述的方法制備得到的重組噬菌體。
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