1.一種β地中海貧血突變檢測試劑盒,由PCR試劑、以尼龍膜為載體的低密度芯片、
雜交試劑組成,其特征在于PCR試劑中三對PCR引物序列分別為:
1F-β:5’-AGTAGCAATTTGTACTGATGGTATGG-3’
1R-β:5’-CCCAGTTTCTATTGGTCTCCTTAAACC-3’
2F-β:5’-GATAGGCACTGACTCTCTCTGC-3’
2R-β:5’-GAACTTAACCATAGAAAAGAAGG-3’
3F-β:5’-GTATCATGCCTCTTTGCACCATTC-3’
3R-β:5’-CACACAGACCAGCACGTTGCCCAGGAGC-3’;
點在低密度芯片上的特異性探針的序列為:
TATA32-N:5’-TGGGCATAAAAGTCAGTG-3’
TATA32-M:5’-TGGGAATAAAAGTCAGGTG-3’
TATA30-N:5’-GGCATAAAAGTCAGGGCTA-3’
TATA30-M:5’-GGCACAAAAGTCAGGGCTA-3’
TATA29-N:5’-GCATAAAAGTCAGGGCATG-3’
TATA29-M:5’-GCATGAAAGTCAGGGCATG-3’
TATA28-N:5’-GCATAAAAGTCAGGGCAGATG-3’
TATA28-M:5’-GCATAGAAGTCAGGGCAGATG-3’
Cap+1-N:5’-CTATCTATTGCTTACATTTG-3’
Cap+1-M:5’-CTATCTATTGCTTCCATTTG-3’
Cap40-43-N:5’-GCAACCTCAAACAGACA-3’
Cap4043-M:5’-GCAACCTCAGACACCAT-3’
Innitiation-N:5’-CTAAACAGACACCATGGTG-3’
Innitiation-M:5’-CTAAACAGACACCAGGGTG-3’
CD8-N:5’-CTGAGGAGAAGTCTGC-3’
CD8-M:5’-CTGAGGAGGTCTGCCG-3’
CD8/9-N:5’-CTGAGGAGAAGTCTGC-3’
CD8/9-M:5’-TGAGGAGAAGGTCTGC-3’
CD14/15-N:5’-TTACTGCCCTGTGGG-3’
CD14/15-M:5’-TTACTGCCCTGGTGG-3’
CD17-N:5’-CTCCTGTGGGGCAAGGTGA-3’
CD17-M:5’-CTCCTGTGGGGCTAGGTGA-3’
CD19-N:5’-GGTGAACGTGGATGAAGTTAG-3’
CD19-M:5’-GGTGGACGTGGATGAAGTTAG-3’
CD26-N:5’-GTAAGTTGGTGGTGAGGC-3’
CD26-M:5’-GTAAGTTGGTGGTAAGGC-3’
CD27/28-N:5’-TGGTGAGGCCCTGG-3’
CD27/28-M:5’-TGGTGAGGCCCCTG-3’
CD30-N:5’-CTTAGGCTGCTGGTGGTCTAC-3’
CD30-M:5’-CTTAGGCTGCTGGTGGTCTAC-3’
CD31-N:5’-CTTAGGCTGCTGGTGGTC-3’
CD31-M:5’-CCTTAGGTGCTGGTGGTC-3’
CD37-N:5’-CCTTGGACCCAGAGGTTAC-3’
CD37-M:5’-CCTTAGACCCAGAGGTTAC-3’
CD41-N:5’-TGGACCCAGAGGTTCTTTG-3’
CD41-M:5’-TGGACCCAGAGGTTTCTTTG-3’
CD41/42-N:5’-GGTTCTTTGAGTCCTTTG-3’
CD41/42-M:5’-GGTTGAGTCCTTTGGGGA-3’
CD43-N:5’-CTTTGAGTCCTTTGGGGACT-3’
CD43-M:5’-CTTTTAGTCCTTTGGGGACT-3’
71/72-N:5’-GGTGCCTTTAGTGATGG-3’
71/72-M:5’-TCGGTGCCTTTTAGTGATG-3’
CD95-N:5’-ACTGTGACAAGCTGCAC-3’
CD95-M:5’-ACTGTGACAAAGCTGCAC-3’
IVSI-1-N:5’-GGCAGGTTGGTATCAAGT-3’
IVSI-1-M:5’-GGCAGTTTGGTATCAAGT-3’
IVS?II-1-N:5’-GTTGGTATCAAGGTTACTA-3’
IVS?II-1-M:5’-GTTGCTATCAAGGTTACAA-3’
IVS?II-5-N:5’-GTAACTTCAGGGTGAGTCT-3’
IVS?II-5-M:5’-GTAACTTCAGGGTGACTCT-3’
IVS?II-nt654-N:5’-TAAGGCAATAGCAATATAC-3’
IVS?II-nt654-M:5’-TAAGGTAATAGCAATATAC-3’
顯色控制點:5’-GCCGTAACCGTCACAATCCGT-3’。
2.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于PCR試劑中上游引物1F-β、2F-β、3F-β的
終濃度為1μM,下游引物1R-β、2R-β、3R-β的終濃度為10μM。
3.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于點在低密度芯片上的特異性探針的濃度為
5μM。
4.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于雜交試劑中雜交液I的組成為2×SSC,
0.5%SDS,雜交液II的組成為0.5×SSC,0.5%SDS,辣根過氧化物酶的用量為0.1U。
5.根據權利要求1的試劑盒,其特征還在于雜交試劑中顯色底物包括TMB或OPD。
展開