本發明公開了一種檢測中國荷斯坦牛產奶性狀的方法及一種試劑盒。本發明提供的檢測中國荷斯坦牛產奶性狀的方法是檢測中國荷斯坦牛自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5＇端第10433-10434位(即DGAT1外顯子8的第15-16位)脫氧核糖核苷酸是AA還是GC，確定所述中國荷斯坦牛的基因型，然后通過基因型確定產奶性狀。本發明提供的試劑盒包括用于PCR擴增含有自GenBank AccessionNo.AJ318490中自5＇端第10433-10434位(即DGAT1外顯子8的第15-16位)核苷酸的基因組片段的引物、限制性核酸內切酶CfrI、PCR試劑和限制性核酸內切酶緩沖液。本發明方法及試劑盒操作簡便、快速、靈敏，使用本方法及試劑盒檢測到的結果可靠、穩定、準確。因此，本發明方法及試劑盒在牛的育種領域將有廣闊的應用前景。

1.一種檢測中國荷斯坦牛產奶性狀的方法，是檢測中國荷斯坦牛自GenBankAccession?No.AJ318490中自5′端第10433-10434位脫氧核糖核苷酸是AA還是GC，確定所述中國荷斯坦牛的基因型，然后通過基因型確定產奶性狀；所述基因型按照如下方法確定：如果自GenBank?Accession?No.AJ318490中自5′端第10433-10434位脫氧核糖核苷酸是AA，其純合體的基因型為KK；如果自GenBank?Accession?No.AJ318490中自5′端第10433-10434位脫氧核糖核苷酸是GC，其純合體的基因型為MM；它們的雜合體基因型為KM；所述產奶性狀為產奶量；所述MM基因型個體的產奶量高于KM基因型個體和KK基因型個體，KM基因型個體高于KK基因型個體；所述檢測中國荷斯坦牛自GenBank?Accession?No.AJ318490中自5′端第10433-10434位脫氧核糖核苷酸是AA還是GC的方法包括如下步驟：先PCR擴增含有自GenBank?Accession?No.AJ318490中自5′端第10433-10434位核苷酸的基因組片段，然后用限制性核酸內切酶CfrI酶切擴增產物；所述PCR擴增的一對引物中，一個引物的核苷酸序列是序列表中序列1，另一個引物的核苷酸序列是序列表中序列2；所述用限制性核酸內切酶CfrI酶切擴增產物的酶切反應體系為：PCR擴增產物8μl，10U/μl?CfrI限制性內切酶1μl，10×內切酶緩沖液1μl，水浴鍋中37℃酶切2小時，將酶切產物進行4％瓊脂糖凝膠電泳檢測，根據電泳結果進行基因型判定；若只得到201bp片段，其基因型為KK純合體；若得到201bp、178bp及23bp三個酶切片段時，其基因型為KM雜合體；若得到178bp和23bp兩個片段時，其基因型為MM純合體。