本發明屬于生物技術領域，公開了一種幽門螺桿菌分型檢測的試劑盒。本發明所述試劑盒包括轉印有經電泳分離的幽門螺桿菌全菌體蛋白的印跡膜。本發明采用免疫印跡法檢測幽門螺桿菌感染者血清中包括致病因子細胞毒(CagA)、空泡毒(VacA)和尿素酶亞單位A和B抗體等多種Hp抗體，依據HP抗體不同確定感染的HP是否產毒株，進而判斷患者所感染Hp菌株血清學類型。本發明所述試劑盒僅需要待檢者提供血清，屬于非侵入性檢查，患者依從性較好，而且檢測快速，整個時間僅需2小時，樣品需求量小，僅需10微升被檢血清，特異性強，敏感性高，適用范圍廣，便于在各級醫院、衛生部門推廣使用。

1.一種幽門螺桿菌分型檢測的方法，其特征在于，待測樣品與印跡膜進
行酶聯免疫反應，然后與陽性對照、陰性對照及標準帶比較；其中所述印跡
膜轉印有經電泳分離的幽門螺桿菌全菌體蛋白；所述酶聯免疫反應中的酶為
辣根過氧化物酶，酶底物為3,3`,5,5`-四甲基聯苯胺。
2.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述印跡膜的制備方法為取
HP全菌體蛋白用樣品緩沖液稀釋，利用SDS-聚丙稀酰胺凝膠梯度不連續電
泳將各種蛋白組分按分子量大小分開，然后利用濕轉法將HP全菌體蛋白由凝
膠層中轉移到固體支持物上即得。
3.根據權利要求1或2所述方法，其特征在于，所述酶聯免疫反應具體
包括如下步驟：
步驟a、待測樣品與洗滌液混合后滴加到印跡膜上孵育；
步驟b、洗滌液洗滌印跡膜；
步驟c、酶標記抗體與洗滌液混合后滴加到印跡膜上孵育；
步驟d、洗滌液洗滌印跡膜；
步驟e、將酶底物滴加到印跡膜上顯色，水洗終止反應。
4.根據權利要求3所述方法，其特征在于，所述酶標記抗體為酶標記的
抗人IgG抗體。
5.根據權利要求3所述方法，其特征在于，所述洗滌液為磷酸鹽緩沖液。
6.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述陽性對照為HP細胞毒
素蛋白抗體、HP空泡毒素蛋白抗體和尿素酶抗體的混合溶液。
7.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述陰性對照為正常人HP
抗體陰性血清。
8.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述標準帶為標示HP細胞
毒、HP空泡毒和尿素酶蛋白距起始線的相對位置的條帶。
9.根據權利要求1任意一項所述方法，其特征在于，所述方法具體包括
如下步驟：
步驟1、使用鑷子將所需數量的印跡膜放到反應槽中，加入1×洗滌液1mL
和待檢樣品10μL，置搖床上室溫搖動30min或置37℃溫箱30min；
步驟2、棄去反應槽液體，在吸水紙上拍干，加入1×洗滌液1mL，洗滌
1min棄去反應槽液體，反復洗滌3次，最后在吸水紙上拍干液體；
步驟3、在反應槽中加入1×洗滌液0.5mL和酶標記抗體10μL，置搖床上
室溫搖動30min或置37℃溫箱30min；
步驟4、棄去反應槽液體，在吸水紙上拍干，加入1×洗滌液1mL，洗滌
1min棄去反應槽液體，反復洗滌3次，最后在吸水紙上拍干液體；
步驟5、在反應槽中加入酶底物0.5mL，在搖床上搖動5±2min，顯色；
步驟6、待質控帶和陽性區帶顯色清晰后，倒掉槽中液體，用自來水或蒸
餾水沖洗3次以終止反應，取出印跡膜條，置吸水紙上，待干后與標準帶對
照判斷結果。