1.基于AllGlo探針熒光定量PCR的hsa-miR-363檢測試劑盒，其特征在于所述
hsa-miR-363為一種人源性miRNA，其核苷酸序列為：SEQIDNO.15＇-
AAUUGCACGGUAUCCAUCUGUA-3＇；
所述基于AllGlo探針熒光定量PCR的hsa-miR-363檢測試劑盒，設有盒體、隔板、外源
性參照瓶、莖環逆轉錄試劑瓶、實時熒光定量PCR試劑瓶；隔板設在盒體內，外源性參照瓶、
莖環逆轉錄試劑瓶、實時熒光定量PCR試劑瓶插在隔板上，外源性參照瓶內裝有外源性參照，
莖環逆轉錄試劑瓶內裝有莖環逆轉錄試劑，實時熒光定量PCR試劑瓶內裝有實時熒光定量
PCR試劑；
所述外源性參照采用cel-miR-39，所述cel-miR-39為一種線蟲類miRNA,其核苷酸序列為：
SEQIDNO.25＇-UCACCGGGUGUAAAUCAGCUUG-3＇；其工作濃度為5nmol/L；
所述莖環逆轉錄試劑包括以下組份：200單位/μL的MMLV酶、10mmoldNTP混合液、
5×RT緩沖液、40單位/μL的RNA酶抑制劑、10mmol的MgCl2、1μmol的特異的miRNA的
逆轉錄引物、miRNA標準品，濃度為100nmol/L；所述5×RT緩沖液由250mmolTris-HCl、
375mmolKCl、15mmolMgCl2、50mmolDTT組成；
所述實時熒光定量PCR試劑包括以下組份：10×Taq緩沖液、10mmol的MgCl2、5單位
/μL的Taq聚合酶、10mmoldNTP混合液、100mL無核酶水、10μmol特異正向引物、10μmol
通用反向引物和AllGlo探針；所述10×Taq緩沖液包括100mmolTris-HCl，500mmolKCl；
所述AllGlo探針由hsa-miR-363的特異探針、內源性參照U6的特異探針和外源性參照
cel-miR-39的特異探針組成；
所述hsa-miR-363的特異探針的核苷酸序列為：
SEQIDNO.10MAR-CACTGGATACGACTACAGATGGA-MAR；
所述內源性參照U6的特異探針的核苷酸序列為：
SEQIDNO.11JUP-CGATACAGAGAAGATTAGCATGGCCCC-JUP；
所述外源性參照cel-miR-39的特異探針的核苷酸序列為：
SEQIDNO.12JUP-TGCACTGGATACGACCAAGCT-JUP。
2.如權利要求1所述基于AllGlo探針熒光定量PCR的hsa-miR-363檢測試劑盒，其特
征在于所述特異的miRNA的逆轉錄引物由hsa-miR-363的特異逆轉錄引物、外源性參照
cel-miR-39的特異逆轉錄引物和內源性參照U6的特異逆轉錄引物組成；
所述hsa-miR-363的特異逆轉錄引物的核苷酸序列為：SEQIDNO.35＇-
GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACTACAGATG-3＇；
所述外源性參照cel-miR-39的特異逆轉錄引物的核苷酸序列為：SEQIDNO.45＇
-GTCGTATCCAGTGCGTGTCGTGGAGTCGGCAATTGCACTGGATACGACCTGTTCCT-3＇；
所述內源性參照U6的特異逆轉錄引物的核苷酸序列為：SEQIDNO.55＇
-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3＇。
3.如權利要求1所述基于AllGlo探針熒光定量PCR的hsa-miR-363檢測試劑盒，其特
征在于所述特異正向引物由hsa-miR-363的特異引物、外源性參照cel-miR-39的特異引物和
內源性參照U6的特異引物組成；
所述hsa-miR-363的特異引物的核苷酸序列為：
SEQIDNO.65＇-GCCGAATTGCACGGTAT-3＇；
所述外源性參照cel-miR-39的特異引物的核苷酸序列為：
SEQIDNO.75＇-CAGAGTCACCGGGTGTAAAT-3＇；
所述內源性參照U6的特異引物的核苷酸序列為：
SEQIDNO.85＇-CTCGCTTCGGCAGCACA-3＇。
4.如權利要求1所述基于AllGlo探針熒光定量PCR的hsa-miR-363檢測試劑盒，其特
征在于所述通用反向引物的核苷酸序列為：
SEQIDNO.95＇-CAGTGCGTGTCGTGGAGT-3＇。
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