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一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒及檢測方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-17
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201610056643.7 
  • 技術(專利)名稱 一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒及檢測方法 
  • 項目單位 中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所
  • 發明人 邢微微,徐東剛,孫魁,王園園,馮驚濤,喻鑫玲,羅志宏,毛金武,付文亮 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李文蘇
  • 發布時間 2021-12-17  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了屬于生物技術領域的一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒及檢測方法。該試劑盒包含RPA凍干顆粒,緩沖液,醋酸鎂,RPA反應引物,RPA反應探針。本發明利用RPA技術建立日本血吸蟲的檢測方法,其靈敏度與特異性與Q?PCR法相當,遠遠高于Kato?Katz法、毛蚴孵育法、ELISA以及IHA,整個反應時間在10?20min內完成,結果判定僅需通過熒光曲線的改變來判定。該檢測試劑盒具有靈敏,特異,結果判定簡便,快捷等優點。不僅適用于床邊診斷而且可以用于現場研究,環境評估。
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  • 02

    說明書

    1.一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,該試劑盒包含:RPA凍干顆
    粒,緩沖液,醋酸鎂,RPA反應引物,RPA反應探針,所述RPA反應引物的核苷酸序列如序列表
    SEQ ID No.1和SEQ ID No.2,所述RPA反應探針的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.3所示。
    2.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑
    盒還包含雙蒸水和日本血吸蟲基因組DNA。
    3.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述RPA凍
    干顆粒包含噬菌體重組酶UvsX,輔助因子UvsY,DNA聚合酶,單鏈DNA結合蛋白,dNTPS。
    4.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述緩沖
    液為Rehydration Buffer。
    5.一種利用權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒的非疾病診斷和治
    療目的的使用方法,其特征在于,包括以下步驟:
    (1)在RPA凍干顆粒中加入29.5μL Rehydration Buffer,2.1μL 10μM Primer A,2.1μL
    10μM Primer B,0.6μL 10μM探針,10.7μL雙蒸水,2.5μL模板,在反應管蓋上加醋酸鎂2.5μ
    L,上下顛倒反應管使之充分混勻后離心,放置于TwistDX熒光檢測器內,儀器自動升溫至38
    ℃孵育,在5-20分鐘內通過觀測熒光曲線進行結果判讀;
    (2)結果判定:含有日本血吸蟲基因組DNA的反應管熒光曲線上升,陰性對照為平滑的
    直線;
    所述Primer A的序列如序列表SEQ ID No.1所示;所述Primer B的序列如序列表SEQ
    ID No.2所示;所述探針的序列如序列表SEQ ID No.3所示;所述模板為日本血吸蟲基因組
    DNA。
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專利技術附圖

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