1.一種基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,該試劑盒包含:RPA凍干顆
粒,緩沖液,醋酸鎂,RPA反應引物,RPA反應探針,所述RPA反應引物的核苷酸序列如序列表
SEQ ID No.1和SEQ ID No.2,所述RPA反應探針的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.3所示。
2.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑
盒還包含雙蒸水和日本血吸蟲基因組DNA。
3.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述RPA凍
干顆粒包含噬菌體重組酶UvsX,輔助因子UvsY,DNA聚合酶,單鏈DNA結合蛋白,dNTPS。
4.根據權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒,其特征在于,所述緩沖
液為Rehydration Buffer。
5.一種利用權利要求1所述基于RPA的日本血吸蟲核酸檢測試劑盒的非疾病診斷和治
療目的的使用方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)在RPA凍干顆粒中加入29.5μL Rehydration Buffer,2.1μL 10μM Primer A,2.1μL
10μM Primer B,0.6μL 10μM探針,10.7μL雙蒸水,2.5μL模板,在反應管蓋上加醋酸鎂2.5μ
L,上下顛倒反應管使之充分混勻后離心,放置于TwistDX熒光檢測器內,儀器自動升溫至38
℃孵育,在5-20分鐘內通過觀測熒光曲線進行結果判讀;
(2)結果判定:含有日本血吸蟲基因組DNA的反應管熒光曲線上升,陰性對照為平滑的
直線;
所述Primer A的序列如序列表SEQ ID No.1所示;所述Primer B的序列如序列表SEQ
ID No.2所示;所述探針的序列如序列表SEQ ID No.3所示;所述模板為日本血吸蟲基因組
DNA。
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