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玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒及檢測方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-07
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210108438.2 
  • 技術(專利)名稱 玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒及檢測方法 
  • 項目單位 黑龍江八一農墾大學
  • 發明人 劉銅,侯巨梅,左豫虎,慕慶峰,馬柄辰 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 朱煜安
  • 發布時間 2021-12-07  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及的是玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒及檢測方法,這種玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒包含2套PCR反應體系,第一套反應體系包括由二條特異性引物SEQIDNO:1和SEQIDNO:3組成的第一對引物對,第二套反應體系包括由二條特異引物SEQIDNO:2和SEQIDNO:3組成的第二對引物對。本發明根據玉米彎孢葉斑病菌clg2p基因設計特異擴增引物,并構建玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒,應用于玉米彎孢葉斑病菌的分子檢測,可準確、快速對玉米彎孢葉斑病原菌的分子鑒定,也可以用于葉斑型和壞死型等癥狀的玉米病苗是否由玉米彎孢葉斑病菌侵染所致,將在玉米彎孢葉斑病菌病原的鑒定和病害的田間監測中具有重大的應用前景。
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  • 02

    說明書

    1.一種玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒包含2套PCR反應體系,第一套反應體系包括由二條特異性引物SEQ?ID?NO:1和SEQ?ID?NO:3組成的第一對引物對,第二套反應體系包括由二條特異引物SEQ?ID?NO:2和SEQ?ID?NO:3組成的第二對引物對,二對引物對引物序列和組合方式如下:第一對:上游引物5`-ACGGAGGATGCGGTATGG-3`???(SEQ?ID?NO:1)????????下游引物5`-CCTCGGAATCGTGCTTTT-3`???(SEQ?ID?NO:3)第二對:上游引物5`-GGGGCTCGCAGGCTAATGT-3`??(SEQ?ID?NO:2)????????下游引物5`-CCTCGGAATCGTGCTTTT-3`???(SEQ?ID?NO:3);第一套反應體系由以下組分組成:以1ml溶液計,100μl?10×PCR?反應緩沖液,?20?μl?濃度為10mM?的dNTP,?200單位Taq酶,濃度均為10mM?的第一對上、下游引物各40?μl?,余量為超純水;第二套反應體系由以下組分組成:以1ml溶液計,100μl?10×PCR?反應緩沖液,?20?μl?濃度為10mM?的dNTP,?200單位Taq酶,濃度均為10mM?的第二對上、下游引物各40?μl?,余量為超純水。2.根據權利要求1所述的玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒,其特征在于:所述的玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒還包括有說明書。3.一種權利要求1或2所述的玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒的檢測方法,其特征在于:該方法包括以下步驟,一、用所述玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒中第一套PCR反應體系,?對樣品進行第一次PCR擴增,獲得PCR擴增產物;所述的樣品是病原菌的分子孢子和病原菌菌絲的DNA提取物,或所述的樣品是玉米葉片組織的DNA提取物;二、取測定步驟一獲得的PCR擴增產物用無菌水按1:50稀釋,然后取1微升稀釋產物作為擴增模板,以所述玉米彎孢葉斑病菌PCR檢測試劑盒中的第二套PCR反應體系,對所述樣品進行第二次PCR擴增,獲得PCR擴增產物;若產物中存在827bp?的DNA片段,則表明所述樣品中有玉米彎孢葉斑病菌。
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專利技術附圖

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