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一種單細胞基因組分析方法及試劑盒

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-19
  • 技術成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010619689.8 
  • 技術(專利)名稱 一種單細胞基因組分析方法及試劑盒 
  • 項目單位 深圳華大基因科技有限公司
  • 發明人 殷旭陽,鮑莉,徐訊,吳漢杰,劉曉羽,張秀清,楊煥明 
  • 行業類別 智慧健康-健康大數據
  • 技術成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李雅嫻
  • 發布時間 2022-01-19  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種單細胞基因組分析方法和試劑盒。所述方法包括:a、獲取完整細胞基因組DNA;b、進行單細胞全基因組擴增;c、對擴增產物進行定量檢測及定性檢測,所述定性檢測是指,采用Housekeeping Gene檢測方法,對單細胞全基因組的擴增產物進行檢測。所述試劑盒含有所述單細胞的Housekeeping Gene的特異性引物。本發明的方法可以全面完整地分析單細胞基因組的遺傳變異信息,并對于全新物種的單細胞基因組研究提供了有效的研究策略;而引入的定性及定量檢測篩選步驟,可去除大量不合格的擴增樣品,從而控制下游上機測序文庫的質量,能從很大程度上避免不必要的浪費。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種單細胞基因組分析方法,所述方法包括步驟:
    a、分離并裂解單細胞,得到完整的細胞基因組DNA;
    b、進行單細胞全基因組擴增;
    c、對擴增產物進行定量檢測及定性檢測,所述定性檢測是指,采用
    Housekeeping?Gene的特異性引物,以全基因組擴增產物為模板進行PCR擴增,
    對單細胞全基因組的擴增產物進行檢測;所述單細胞為人單細胞,所述
    Housekeeping?Gene為位于1號染色體的PRDX6、位于2號染色體的RPL37a、
    位于4號染色體的ADD1、位于6號染色體的HLA-A、位于11號染色體的
    RAD9A、位于13號染色體的ARHGEF7、位于14號染色體的EIF2B2、位于16
    號染色體的PSMD7、位于19號染色體的BCAT2、及位于21號染色體的ATP5O;
    所述Housekeeping?Gene檢測的特異性引物分別為:

    結果顯示為至少8對引物出現條帶的樣品為符合要求的樣品。
    2.根據權利要求1所述的一種單細胞基因組分析方法,其特征在于:所述
    方法還包括步驟d、檢測合格的樣品進行DNA文庫構建并測序。
    3.根據權利要求1或2所述的一種單細胞基因組分析方法,其特征在于:
    所述步驟b中單細胞全基因組擴增采用多重置換擴增MDA或DOP-PCR全基因
    組擴增。
    4.一種單細胞基因組分析試劑盒,其特征在于:所述試劑盒含有所述單細
    胞的Housekeeping?Gene的特異性引物,用于對單細胞全基因組擴增產物進行檢
    測;所述單細胞為人單細胞,所述Housekeeping?Gene為位于1號染色體的
    PRDX6、位于2號染色體的RPL37a、位于4號染色體的ADD1、位于6號染色
    體的HLA-A、位于11號染色體的RAD9A、位于13號染色體的ARHGEF7、位
    于14號染色體的EIF2B2、位于16號染色體的PSMD7、位于19號染色體的
    BCAT2、及位于21號染色體的ATP5O;所述Housekeeping?Gene檢測的特異性
    引物分別為:

    5.根據權利要求4所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還含有用于對
    單細胞進行全基因組擴增的試劑成分,所述單細胞全基因組擴增采用多重置換
    擴增MDA或DOP-PCR。
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