一種環介導等溫擴增檢測剛地弓形蟲的試劑盒及方法，用于測定微生物。本發明的試劑盒由一套設計的引物、10×LAMP反應液、DNA聚合酶、陽性對照、陰性對照和顯色劑組成。采用本發明可以定性定量檢測剛地弓形蟲。本發明利用Bst DNA酶的鏈置換特性，設計4條引物，識別靶序列的6個區域，在等溫條件下生成大量重復的莖環狀結構，在定性檢測時不需任何特殊設備。因此具有特異性、敏感性高和檢測時間比普通PCR短的特點。

1.一種環介導等溫擴增檢測剛地弓形蟲的引物，其特征在于：由一對外引物和一對內引物組成，其序列為：外引物1：GGGAATGAAAGAGACGCTAA外引物2：CTGTGTACCTCTTCTCGTATT內引物1：TGCACAGATACTCATGAATTTCACTGTTTGCATAGGTTGCAGTC內引物2：ACTTTGGTGTATTCGCAGATTGGTTCACGATCTTCTTCTCCTG其中，所述的一對外引物與一對內引物的摩爾數之比為1∶6～9。2.一種環介導等溫擴增檢測剛地弓形蟲的試劑盒，其特征在于：由一套引物、10倍環介導等溫擴增反應液、DNA聚合酶、陽性對照、陰性對照和顯色劑組成；所述的一套引物是由一對外引物和一對內引物組成，其序列為：外引物1：GGGAATGAAAGAGACGCTAA外引物2：CTGTGTACCTCTTCTCGTATT內引物1：TGCACAGATACTCATGAATTTCACTGTTTGCATAGGTTGCAGTC內引物2：ACTTTGGTGTATTCGCAGATTGGTTCACGATCTTCTTCTCCTG其中，所述的一對外引物與一對內引物的摩爾數之比為1∶6～9；所述的DNA聚合酶為具有鏈置換作用的Bst?DNA聚合酶，活力為8個活性單位/微升；所述的陽性對照為含有插入剛地弓形蟲一段特異序列的陽性質粒，環介導等溫擴增反應擴增區位于該特異序列中，其濃度為10⁷拷貝/μl；所述的陰性對照為滅菌雙蒸水；所述的顯色劑為20倍SYBR?Green?I。3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：所述的10倍環介導等溫擴增反應液是由200mM三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、100mM氯化鉀、100mM硫酸銨、40～100mM硫酸鎂、4～10M甜菜堿、5～18mM的dNTPs、和1％質量百分濃度的曲拉通X-100組成。