1.一種用于檢測β-內酰胺類抗生素的受體試劑盒,包括:SEQ?ID?NO:1所示蛋
白、酶標記的氨芐西林和標準品溶液,所述標準品為青霉素G;
所述受體試劑盒還包括底物顯色液、終止液、洗滌液、樣品稀釋液、包被緩沖液
和封閉液;
底物顯色液由A液和B液組成,A液為質量百分含量為2%的過氧化脲的水溶液,
B液為質量百分含量為1%的四甲基聯苯胺的水溶液;
終止液為0.2M的硫酸水溶液;
每1升所述洗滌液是按照如下方法配制得到的:將0.5ml吐溫20、5g疊氮化鈉
和990ml磷酸鹽緩沖液混合,得到所述洗滌液;所述磷酸鹽緩沖液的濃度為0.01M,pH
值為7.4;
樣品稀釋液:0.1mol/L、pH值為7.2的磷酸鹽緩沖液;
每1升包被緩沖液按照如下方法制備:將Na2CO31.59g和NaHCO32.93g溶于1升
水中,用水定容至1升,得到所述包被緩沖液;
每1升封閉液按照如下方法配制:將50mgBSA、1g疊氮化鈉、30g酪蛋白混合,
用磷酸鹽緩沖液溶解并定容至1000ml,得到封閉液;其中,磷酸鹽緩沖液的濃度為
0.02M,pH值為7.2;
所述β-內酰胺類抗生素為如下中的至少一種:青霉素G、氨芐西林、阿莫西林、
苯唑西林、鄰氯西林、新青霉素Ⅲ、雙氯西林、羧芐西林、甲氧西林、頭孢氨芐、頭
孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢噻吩、頭孢羥氨芐、頭孢噻呋、頭孢
喹肟。
2.根據權利要求1所述的受體試劑盒,其特征在于:所述酶標記的氨芐西林為
HRP標記的氨芐西林;
所述標準品溶液為青霉素G濃度如下的溶液:8.1μg/L、2.7μg/L、0.9μg/L、
0.3μg/L、0.1μg/L。
3.一種檢測β-內酰胺類抗生素的膠體金試紙,包括樣品吸收墊、膠體金墊、反
應膜和吸水墊,其依次連接;所述膠體金墊包被有膠體金標記的帶有HIS標簽的SEQ?ID
NO:1所示蛋白;所述反應膜上含有檢測帶和質控帶,檢測帶位置包被有阿莫西林與
載體蛋白的偶聯物,質控帶位置包被有鼠抗HIS標簽單克隆抗體;
所述β-內酰胺類抗生素為如下中的至少一種:青霉素G、氨芐西林、阿莫西林、
苯唑西林、鄰氯西林、新青霉素Ⅲ、雙氯西林、羧芐西林、甲氧西林、頭孢氨芐、頭
孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢噻吩、頭孢羥氨芐、頭孢噻呋、頭孢
喹肟。
4.根據權利要求3所述的膠體金試紙,其特征在于:所述載體蛋白為OVA。
5.一種檢測樣品中β-內酰胺類抗生素的方法,為如下Ⅰ或Ⅱ所示:
Ⅰ、檢測樣品中β-內酰胺類抗生素的方法包括如下步驟:
1)將待測樣品進行前處理,得到待測樣本溶液;
2)用權利要求1或2所述受體試劑盒對所述待測樣本溶液進行檢測;
所述待測樣品為牛奶:將牛奶用樣品稀釋液按1:4稀釋,4℃、10000rpm離心,
取上清液,作為待測樣本溶液;
所述待測樣品為奶粉:稱取1g奶粉,溶于5mL樣品稀釋液中,混合均勻,作為待
測樣本溶液。
所述待測樣品為尿液:將尿液直接作為待測樣本溶液;
所述待測樣品為肌肉、魚、蝦或蛋:將待測樣品勻漿處理,得到均質樣品,將每
5g均質樣品加入10mL乙腈水溶液中,上下顛倒震蕩10min,5000rpm離心10min,取
上清,氮氣吹干,用1mL樣品稀釋液重懸,得到的溶液即為待測樣本溶液;乙腈水溶
液中乙腈和水的體積比為9:1;
所述待測樣品為蜂蜜:將每5g待測樣品加入15mL去離子水中,混合;將所述混
合溶液用Oasis固相萃取柱進行純化,用甲醇洗脫,收集洗脫液,氮氣吹干,用1mL
樣品稀釋液重懸,得到的溶液即為待測樣本溶液。
Ⅱ、檢測樣品中β-內酰胺類抗生素的方法包括如下步驟:
1)將待測樣品進行前處理,得到待測樣本溶液;
2)用權利要求3或4所述所述膠體金試紙對所述待測樣本溶液進行檢測;
所述樣品稀釋液為0.1mol/L、pH值為7.2的磷酸鹽緩沖液。
6.SEQ?ID?NO:1所示蛋白在檢測β-內酰胺類抗生素中的應用;
所述β-內酰胺類抗生素為如下中的至少一種:青霉素G、氨芐西林、阿莫西林、
苯唑西林、鄰氯西林、新青霉素Ⅲ、雙氯西林、羧芐西林、甲氧西林、頭孢氨芐、頭
孢唑啉、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢噻吩、頭孢羥氨芐、頭孢噻呋、頭孢
喹肟。
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