本發(fā)明公開了一種利用DPO-PCR方法檢測溶藻弧菌的DPO引物序列及檢測試劑盒。選擇溶藻弧菌collagenase基因為靶基因，設(shè)計DPO引物，其核苷酸序列為：VA-DPOF：5ˊ-TCGCGATTGCGACAACATTAA<u>IIIII</u>ACTGGCGT-3ˊ，VA-DPOR：5ˊ-ACAAACGCATCCACTGATTCTTTC<u>IIIII</u>TGGGGTGA-3ˊ；建立DPO-PCR檢測方法，可對溶藻弧菌進(jìn)行精確定性檢測。本發(fā)明還涉及檢測用試劑盒，含有如上所述的DPO引物對、陽性對照品、陰性對照品、Taq？DNA？Polymerase和PCR反應(yīng)液，具有檢測特異性高、準(zhǔn)確性高、靈敏度好的優(yōu)點。

1.一種基于DPO引物檢測溶藻弧菌的PCR方法檢測用引物對，其特征在于，上引物VA-DPOF：如序列表SeqIDNo.1所示，下引物VA-DPOR：如序列表SeqIDNo.2所示。2.一種用于非疾病診斷目的的基于DPO引物檢測溶藻弧菌的PCR檢測方法，其特征在于，檢測溶藻弧菌的PCR反應(yīng)體系如下： ；PCR反應(yīng)條件為：95℃5min；94℃15s、48℃～68℃20s、72℃30s，35個循環(huán)；72℃延伸10min；所述的上引物VA-DPOF：如序列表SeqIDNo.1所示，下引物VA-DPOR：如序列表SeqIDNo.2所示。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于DPO引物檢測溶藻弧菌的PCR方法檢測用引物對，其特征在于，所述的引物對退火溫度不敏感，有效溫度范圍為48℃～68℃。4.一種基于DPO引物檢測溶藻弧菌的PCR方法檢測用試劑盒，其特征在于，包括引物對：上引物VA-DPOF：如序列表SeqIDNo.1所示，下引物VA-DPOR：如序列表SeqIDNo.2所示；陽性對照品pMD-T-collagenase：如序列表SeqIDNo.5所示；陰性對照品ddH₂O和PCR反應(yīng)液：Mg²⁺free的10×PCRBuffer；dNTP，Mg²⁺，上游引物VA-DPOF，下游引物VA-DPOR和TaqDNAPolymerase。