一種定量檢測ERCC1?202的試劑盒及應用，包括ERCC1?202上下游引物、β?Actin內參的上下游引物、ERCC1?202探針和β?Actin探針。本發明通過構建ERCC1?202與內參β?Actin基因的標準質粒，分別按照標準曲線法對ERCC1?202及β?Actin進行絕對定量，進而實現ERCC1?202相對定量，可為腫瘤病人用藥提供參考依據。本發明可以特異性檢測ERCC1基因的202亞型mRNA的表達量，不受其他亞型干擾，具有特異性強、敏感性高、結果穩定等優點。

1.一種定量檢測ERCC1-202的試劑盒，其特征在于包括：
ERCC1-202上游引物5'- GGCAAAATCCAACAGCATCAT -3'；
ERCC1-202下游引物5'- GCTCGTGCAGGACATCAAACA -3'；
β-Actin內參的上游引物5'- ATCCTCACCCTGAAGTACCC -3'；
β-Actin內參的下游引物5'- ACGCAGCTCATTGTAGAAGG -3'；
ERCC1-202探針5'- F-CAAATGTGGTCAGGAGGGTCT-Q -3'；
β-Actin探針5'- F- CAGATTTTCTCCATGTCGTCCCA -Q-3'；
其中F為報告熒光基團，Q 為淬滅熒光基團。
2.根據權利要求1所述定量檢測ERCC1-202的試劑盒，其特征在于所述報告熒光基團為
FAM、TAMRA、JOE、HEX或TET；所述淬滅熒光基團為BHQ或MGB。
3.根據權利要求1所述定量檢測ERCC1-202的試劑盒，其特征在于利用引物和探針分別
對標準品及待檢檢測樣品進行熒光定量PCR 擴增，擴增過程中收集熒光信號，PCR擴增體系
包括Taq 酶、Buffer、dNTP、ERCC1-202上下游引物、ERCC1-202探針、β-Actin 上下游引物、
β-Actin探針、cDNA模版以及雙蒸水；PCR擴增程序是95℃ 2min；95℃ 30sec，56℃ 50sec，
循環40 次。
4.根據權利要求3所述定量檢測ERCC1-202的試劑盒，其特征在于PCR檢測的標準品包
括含有ERCC1-202質粒標準品和含有β-Actin基因的質粒標準品；待檢檢測樣品為從腫瘤組
織中抽提的總RNA 經反轉錄獲得的cDNA。
5.根據權利要求3所述定量檢測ERCC1-202的試劑盒，其特征在于待檢檢測樣品來源包
括新鮮手術病理切片、肺部穿刺活檢標本、內鏡活檢標本、胸水脫落細胞、腹水脫落細胞或
體外培養細胞。